[發明專利]一種促進毛發再生的外用藥物及其制備方法

在審

• 申請號: 202011207368.7
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112263673A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 周翔;李勝華
• 申請（專利權）人: 華科同濟干細胞基因工程有限公司
• 主分類號: A61K38/22
• 分類號: A61K38/22;A61P17/14;C12N5/074;A61K35/36
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 王穎

1.一種促進毛發再生的外用藥物，其特征在于：包含毛囊干細胞培養基上清液和胸腺肽聯用。

2.根據權利要求1所述的一種促進毛發再生的外用藥物，其特征在于：所述胸腺肽的質量分數為0.01-0.1％。

3.根據權利要求1所述的一種促進毛發再生的外用藥物，其特征在于：將毛囊干細胞培養基上清液分裝后置于4℃保存，胸腺肽為靜脈注射或腹腔給藥。

4.一種促進毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于：將毛囊干細胞培養基上清液分裝后置于4℃保存，與質量分數0.01-0.1％胸腺肽混合，所述毛囊干細胞培養基上清液的培養方法包括以下步驟：

(1)取健康毛囊以青-鏈霉素的PBS液反復沖洗；

(2)在解剖顯微鏡下采用顯微手術剪剪下毛囊外根鞘隆突部，放到培養皿中；加入毛囊干細胞培養基，37℃、5％CO₂孵箱培養；

(3)次日補加等量培養基1.5mL，在倒置顯微鏡下觀察毛囊外根鞘隆突部有無梭形生長的細胞爬出，待細胞融合達80％后傳代培養；

(4)將上述毛囊干細胞消化，用毛囊干細胞培養液制成1.0×105個/mL的毛囊干細胞懸液，計數；

(5)按質量比1:1混合1.2％的瓊脂糖和DMEM/F12培養基后，取2ml混合液注入35cm²培養皿中，待冷卻凝固后，置入培養箱中備用；

(6)按1:1比例將0.7％瓊脂糖和毛囊干細胞培養基在無菌試管中混合后，在向管中加入1/10體積的毛囊干細胞懸液，充分混勻，注入培養基I的培養皿中，加入量等于培養基I；

(7)2天一次更換培養基，總共培養10天，得到毛囊干細胞培養基上清液。

5.根據權利要求4所述的一種促進毛發毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于，所述毛囊干細胞培養液含10％FBS、100U/mL青鏈霉素雙抗、2ng/ml bFGF的DMEM/F12。

6.根據權利要求4所述的一種促進毛發毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于，所述培養基I，按1:1混合1.2％的瓊脂糖和DMEM/F12培養基后，取2ml混合液注入35cm²培養皿中，待冷卻凝固后，置入培養箱中備用。

7.根據權利要求4所述的一種促進毛發毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于，所述毛囊干細胞消化的消化液包含質量百分含量為0.1％的胰酶和0.008％的EDTA的磷酸緩沖液。

8.根據權利要求4所述的一種促進毛發毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于，所述健康毛囊取自腦后枕部。

9.根據權利要求7所述的一種促進毛發毛發再生的外用藥物的制備方法，其特征在于，所述消化條件為37℃消化3-5分鐘。