[發明專利]一種遺傳性原發不孕的致病突變及其檢測試劑

有效

• 申請號: 202011207067.4
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112226440B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 霍然;凌秀鳳;曹琦琦;趙純;王叢靜;張軍強;張笑蘭
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12Q1/6883;G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

本發明公開了一種遺傳性原發不孕的致病突變及其檢測試劑。一種導致遺傳性原發不孕的突變的NLRP5基因，所述的突變為純合的移碼突變NLRP5 c.2945delT p.Leu982fs。檢測本發明所述的突變的NLRP5基因或本發明所述的突變的NLRP5蛋白的試劑在制備女性原發不孕的輔助診斷試劑或檢測設備中的應用。本發明提供了重要母源致病基因NLRP5的新致病位點，為該疾病的診斷提供了新的分子生物學基礎。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及一種遺傳性原發不孕的致病突變及其檢測試劑。

背景技術

不孕不育已成為現代社會常見病，WHO數據表明不孕不育現已成為僅次于腫瘤和心腦血管疾病的第三大疾病。國家計生委發布的數據顯示，中國育齡夫婦的不孕不育率近年已攀升至12％-15％，其中女性患者人數已超2500萬，因此探究女性不孕癥病因已顯得尤為迫切。輔助生殖技術是目前廣泛采用的不孕癥治療手段,但是臨床上仍然有部分不孕癥病例既沒有找到病因也沒有找到有效的醫治方法，有相當部分的女性患者不斷經歷著反復的ART周期失敗，她們的共同特點為早期胚胎發育障礙。這一臨床表型背后的遺傳學因素及機制一直未知。因此，發現、鑒定可能的遺傳因素對臨床診治尤為重要。

早期胚胎發育障礙以早期胚胎停滯在卵裂期不能發育至囊胚為特征的生殖障礙，其致病機制研究多借助于動物模型，人類的致病基因及遺傳模式鮮有報道。研究早期胚胎發育障礙的一個重要目的是對其引起的女性原發性不孕癥進行分子診斷。鑒于人類胚胎發育障礙所致不孕相關研究尚有空缺，發現胚胎發育障礙全新的致病基因及位點的研究方法顯得尤為重要。高通量二代測序技術能夠高效的針對大量基因的遺傳信息進行捕獲，是尋找復雜遺傳性疾病致病基因及其突變最有效的方法，具有傳統技術所不可及的優勢。

NLR family pyrin domain containing 5基因位于19號染色體長臂19q13.43位置，該基因含有15個外顯子，其編碼的NLRP5蛋白是一種含有1200個氨基酸的卵母細胞特異性表達蛋白。目前有研究報道NLRP5是重要的母源性蛋白，對于小鼠及人類早期胚胎發育、生命個體起始至關重要，但其致病突變位點仍有待進一步確認。

遺傳所致的原發性不孕嚴重危害了國民的生殖健康。挖掘其新致病突變有利于進一步探索遺傳性原發性不孕的分子遺傳學病因，是充分利用我國的生殖遺傳病資源，造福不孕不育患者的現實需要，是基因組時代最重要的研究方向之一。

本專利旨在探索原發性不孕的遺傳學病因，從而幫助了解發病機制、輔助臨床診斷、產前診斷和轉基因治療。

發明內容

本發明的目的是針對上述障礙，提供一種遺傳性原發不孕的致病突變。

本發明的另一目的是提供該致病突變的應用。

本發明的又一目的是提供該致病突變的檢測試劑。

本發明的目的可通過如下技術方案實現:

一種導致遺傳性原發不孕的突變的NLRP5基因，所述的突變為純合的移碼突變NLRP5c.2945delT p.Leu982fs；野生型NLRP5基因在Ensemble數據庫中的基因編號為：ENSG00000171487，NLRP5基因的突變在物理位置在第11外顯子，為56552446的堿基T缺失，后續序列造成移碼突變，其他部分與野生型相同。

本發明所述的突變的NLRP5基因編碼的突變的NLRP5蛋白，其特征在于野生型NLRP5蛋白在Ensemble數據庫中的基因轉錄本編號為ENST00000390649.3，突變的NLRP5蛋白在第982號氨基酸移碼突變，在翻譯2個新的氨基酸后遇到終止密碼子，蛋白質終止翻譯，蛋白質序列截短，且突變后本來編碼富含亮氨酸重復序列LRR的外顯子不再編碼蛋白，其他部分與野生型相同。

本發明所述的突變的NLRP5基因或本發明所述的突變的NLRP5蛋白作為檢測靶點在制備女性原發不孕的輔助診斷試劑或檢測設備中的應用。