[發明專利]一種建立中國石蒜或忽地笑再生體系的組培培養基及其方法

有效

• 申請號: 202011202037.4
• 申請日: 2020-11-02
• 公開（公告）號: CN112237142B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 鄭玉紅;張鵬翀;顧永華;韓福貴;鮑淳松
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所;杭州植物園（杭州西湖園林科學研究院）
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00;A01G24/28;A01G24/15;A01G24/10;A01G22/35
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

1.一種建立中國石蒜或忽地笑再生體系的組培培養基，其特征在于，由愈傷組織培養基、壯芽培養基、壯苗和生根培養基組成；

所述愈傷組織培養基由誘導培養基、增殖培養基和分化培養基組成；

所述誘導培養基以MS培養基為基本培養基，還由以下含量組分組成：葡萄糖20～25g/L、瓊脂7.0～7.5g/L、TDZ 2.0～2.5mg/L、2,4-D 2.0～2.5mg/L和碳納米管0.5～2.0mg/L；

所述誘導培養基的pH值為5.5～6.0；

所述增殖培養基以MS培養基為基礎培養基，還由以下含量組分組成：葡萄糖20～25g/L、瓊脂7.0～7.5g/L、TDZ 2.5～3.0mg/L、2,4-D 2.0～2.5mg/L和碳納米管2.0～5.0mg/L；

所述增殖培養基的pH值為5.5～6.0；

所述分化培養基，以MS培養基為基礎培養基，還由以下含量組分組成：蔗糖30g/L、瓊脂7.0～7.5g/L、6-BA 2.5～3.0mg/L、NAA 0.5～1.5mg/L和碳納米管2.0～5.0mg/L；

所述分化培養基的pH值為5.5～6.0；

所述壯芽培養基，以MS培養基為基礎培養基，還由以下含量組分：蔗糖40g/L、瓊脂7.0～7.5g/L、6-BA 2.5～3.0mg/L、NAA 1.0～1.5mg/L和碳納米管2.0～5.0mg/L；

所述壯苗培養基的pH值為5.5～6.0；

所述壯苗和生根培養基，以MS培養基為基礎培養基，還由以下含量組分組成：蔗糖40g/L、瓊脂7.0～7.5g/L、6-BA 1.5～2.0mg/L、NAA 0.5～1.0mg/L、IBA 2.0～3.5mg/L和碳納米管2.0～5.0mg/L；

所述壯苗和生根培養基的pH值為5.5～6.0。

2.一種基于權利要求1所述的培養基建立中國石蒜或忽地笑再生體系的方法，其特征在于，步驟如下：

以中國石蒜或忽地笑發育成熟的種胚作為外植體；

將所述種胚接種于誘導培養基進行誘導培養，得到愈傷組織；

將誘導培養得到的愈傷組織接種于增殖培養基進行增殖培養，得到增殖愈傷組織；

將所述增殖愈傷組織接種于分化培養基進行分化培養，得到分化叢生芽；

將所述分化叢生芽接種于壯芽培養基進行壯芽培養，得到壯芽苗；

將所述壯芽苗接種于壯苗和生根培養基進行壯苗和生根培養，得到生根苗；

將生根苗進行繼代培養，得繼代培養苗；

將所述繼代培養苗進行移栽培養，得到中國石蒜或忽地笑苗。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述誘導培養的溫度為24～26℃；所述誘導培養的光源為LED紅光和藍光1:1，光照強度為40～100μmol·m^-2·s^-1，光照時間為16h；

所述增殖培養的溫度為24～26℃；所述增殖培養的光源為LED紅光和藍光1:1，光照強度為40～100μmol·m^-2·s^-1，光照時間為16h。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述分化培養的溫度為24～26℃；所述分化培養的光源為LED白光，光照強度為100～300μmol·m^-2·s^-1，光照時間為16h。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述移栽培養時所用栽培基質包括泥炭土、珍珠巖和田園土；所述栽培基質中泥炭土、珍珠巖和田園土的體積比為1:1:1。