[發明專利]一種葡萄糖氧化酶活性測定的比色分析法

在審

• 申請號: 202011197256.8
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112301092A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 張慶芳;陳立功;王曉輝;劉春瑩;遲乃玉;郭洪星;涂淑儀;張冉;解皓
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: C12Q1/26
• 分類號: C12Q1/26;G01N21/31;G01N21/75
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 趙淑梅;李馨

1.一種葡萄糖氧化酶活性測定的比色分析法，其特征在于，所述方法為：將待測葡萄糖氧化酶液和葡萄糖溶液反應后加入到鄰聯茴香胺溶液和辣根過氧化物酶混合溶液中，測460nm處的吸光度。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具體步驟為：

(1)將150μL鄰聯茴香胺溶液和10μL辣根過氧化物酶溶液混合均勻，于25℃下保存10min；

(2)將150μL待測葡萄糖氧化酶液和750μL葡萄糖溶液混合均勻，于30℃下保存5min；

(3)將步驟(2)所得的產品加入到步驟(1)所得產品中，反應10s，測460nm處的吸光度；

(4)根據標準曲線得到待測葡萄糖氧化酶的活性。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述鄰聯茴香胺溶液通過以下方法制備：將7mg鄰聯茴香胺用濃度為95wt.％的乙醇溶解，定容至100mL，置于4℃冰箱中保存。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述辣根過氧化物酶溶液通過以下方法制備：將5mg辣根過氧化物酶用20mL無菌水溶解，定容至50mL。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖溶液的濃度為5wt.％。

6.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，標準曲線通過以下方法得到：分別將過氧化氫標準品中過氧化氫的質量為0ng、20ng、40ng、60ng、80ng、100ng的過氧化氫標準品用超純水定容至180μL，加入到步驟(1)所得產品中，反應10s，測定過氧化氫標準品在460nm處的吸光度，以吸光度值為縱坐標，以過氧化氫標準品中過氧化氫的質量為橫坐標得到標準曲線。