[發明專利]一種健康人免疫功能評估分析方法

在審

• 申請號: 202011197023.8
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112268849A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 賈正虎;尹芝南
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14;G01N33/569
• 代理公司: 天津展譽專利代理有限公司 12221
• 代理人: 鄭曉晨

本發明公開了一種健康人免疫功能評估分析方法，屬于生物醫學和免疫檢驗技術領域，包括如下步驟：步驟一，取健康人群的血液樣本進行預處理，待測細胞染色并制成單細胞懸液，將單細胞懸液與抗體混合，得到單細胞?抗體混合液，采用流式細胞術檢測單細胞?抗體混合液中的免疫細胞水平，得出流式圖；步驟二，將步驟一的流式圖進行若干層圈門統計分析，得出所需細胞比例；步驟三，將步驟二中的細胞比例按照不同年齡、不同性別進行對比分析。用本發明去檢測健康人免疫功能，可全面的評估血液里面的各免疫細胞的數量及比例、活性和衰竭程度，有助于了解并界定未患病人群的免疫功能，為人群健康監測提供指導和依據。

技術領域

本發明屬于生物醫學和免疫檢驗技術領域，尤其是涉及一種健康人免疫功能評估分析方法。

背景技術

免疫功能是指機體對疾病的抵抗力，機體的免疫功能是在淋巴細胞、單核細胞和其他有關細胞及其產物的相互作用下完成的，其中包括以自然殺傷細胞(NK)為主的天然免疫和以T細胞和B細胞為主的適應性免疫。

人體免疫細胞的免疫功能與各類疾病的發生、進展均有直接相關性，在人體健康維護、抗衰老、抗腫瘤中起著關鍵作用，但是目前的科研研究和臨床診斷均是面對已患有疾病的病人，而亞健康和健康人群在還沒有到達疾病的時候，這個階段的免疫功能怎么去界定和評估是未知的，因此急需一項健康人免疫功能評估的手段，以便更好的評價分析未患病人群的免疫功能。

發明內容

本發明要解決的問題是提供一種健康人免疫功能評估分析方法，全面的評估血液里面的各免疫細胞的數量、比例、活性和衰竭程度，有助于了解并界定未患病人群的免疫功能，為人群健康監測提供指導和依據。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種健康人免疫功能評估分析方法，包括如下步驟：

步驟一，取健康人群的血液樣本進行預處理，待測細胞染色并制成單細胞懸液，將單細胞懸液與抗體混合，得到單細胞-抗體混合液，采用流式細胞術檢測單細胞-抗體混合液中的免疫細胞水平，得出流式圖；

步驟二，將步驟一的流式圖進行若干層圈門統計分析，得出所需細胞比例；

步驟三，將步驟二中的細胞比例按照不同年齡、不同性別進行對比分析。

在步驟一中，健康人群包括20歲至80歲的男性和20歲至80歲的女性。

在步驟二中，將流式圖中的活細胞和淋巴細胞進行圈門，得出第一層流式圖。

在第一層流式圖中用CD3⁺T細胞進行圈門，得到第二層流式圖，在第二層流式圖中用CD4⁺T細胞進行圈門，得出第三層流式圖，在第三層流式圖中分別用CD28^-CD4⁺T細胞、CD28⁺CD4⁺T細胞進行圈門，得出第四流式圖。

在第一層流式圖中用CD3⁺T細胞進行圈門，得到第二層流式圖，在第二層流式圖中用CD8⁺T細胞進行圈門，得出第三層流式圖，在第三層流式圖中用CD28^-CD8⁺T細胞進行圈門，得出第四流式圖。

在第一層流式圖中用CD3⁺T細胞進行圈門，得到第二層流式圖，在第二層流式圖中分別用γδT細胞、調節性T細胞或TNK細胞進行圈門得出第三層流式圖。

在第一層流式圖中用NK細胞進行圈門，得到第二層流式圖，在第二層流式圖中分別用CD56high NK細胞、CD56dim NK細胞圈門得出第三層流式圖。

在第一層流式圖中用B細胞進行圈門，得出第二層流式圖。