[發明專利]一種促進節菱孢菌高效產孢的培養基及其方法

在審

• 申請號: 202011193505.6
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112239729A
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 廖潔;莫磊興;蔣文艷;吳小建;王天順;李慧玲;何潔;陳偉;王海軍;程亮
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 南寧市來來專利代理事務所(普通合伙) 45118
• 代理人: 來光業

本發明公開了一種促進節菱孢菌高效產孢的培養基及其方法，所述培養基為甘蔗汁培養基或馬鈴薯汁培養基，所述方法是將節菱孢菌種在PDA培養基上活化后接種至甘蔗汁培養基或馬鈴薯汁培養基中進行恒溫培養7?15d。其中，甘蔗汁培養基含以下配比物質：甘蔗汁30?100g/L，七水硫酸鎂1.0g/L，磷酸二氫鉀1.0g/L，瓊脂20g/L；馬鈴薯汁培養基含以下配比物質：馬鈴薯50?400g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂20g/L。采用本發明的培養基及其培養方法對節菱孢菌進行培養，可以促進節菱孢菌高效產孢，快速獲得產孢的節菱孢菌用于擴繁，最快7天即可獲得產孢的節菱孢菌，完成一代繁殖進入下一代的擴繁。將本發明的培養基及其培養方法用于節菱孢菌的擴繁，能極大地縮短節菱孢菌的擴繁周期。

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及一種促進節菱孢菌高效產孢的培養基及其方法。

背景技術

節菱孢菌是在自然界中不常見的一類霉菌，會在適宜的條件下生長繁殖產生3-硝基丙酸(3-nitropropionicacid，3-NPA)，3-硝基丙酸是一種親神經毒性物質，可以損害人的中樞神經系統、消化系統、呼吸系統以及泌尿系統，人只要吃進少則100克，多則1000克霉變甘蔗即可導致丙酸中毒。現有研究表明，節菱孢菌在甘蔗產區(廣東、廣西)和變質甘蔗中毒發病區(主要是北方地區)的甘蔗樣品中均有分布，分別為7.6%(9/19)和56.4%(53/94)，后者明顯高于前者，甘蔗產區節菱孢菌產毒株占72.9%(35/48)，中毒發病區的產毒株占l7.6%(40/227)。

3-硝基丙酸是一種生物素，大劑量多次注射3-NPA(30mg/kg，注射2次)可通過選擇性抑制琥珀酸脫氫酶從而抑制線粒體功能，妨礙細胞電活動的傳導導致細胞死亡。3-硝基丙酸雖然有毒，但是萬物相生相克，近年國內外研究發現適當劑量單次3-NPA(20mg/kg，注射一次)預處理時可提高神經元的缺血和缺氧耐受性，其保護機制可能涉及腺苷受體的激活等環節。現有研究表明，紅藻氨酸所致顳葉癲癇模型中，小劑量3-硝基丙酸預處理可以對紅藻氨酸致癇大鼠海馬神經細胞凋亡和p53蛋白表達有抑制作用，小劑量3-硝基丙酸預處理對紅藻氨酸致癇大鼠海馬細胞凋亡具有一定保護作用，其保護機制可能涉及腺苷受體的激活環節（陳利鋒.3-硝基丙酸對紅藻氨酸致癇大鼠海馬神經細胞凋亡和p53蛋白表達影響研究[D]，2006 年，第一軍醫大學：神經外科學）。3-硝基丙酸預處理可通過開放線粒體ATP敏感性鉀通道，上調缺血半暗帶區Bcl-2蛋白表達，下調Bax蛋白表達，減少神經元凋亡，對腦缺血損傷起保護作用（鄭倆燕,許榮華,陳志斌,李紅戈,梅元武.3-硝基丙酸預處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注細胞凋亡的影響[J]，《廣東醫學》2008年12期）。3-硝基丙酸多次預處理可通過減少丙二醛生成，激發還原型谷胱甘肽合成，保護多巴胺神經元，達到預防帕金森病的作用（梁直厚,鄧學軍,孫圣剛,等.3-硝基丙酸多次預處理對多巴胺能神經元的保護機制[J]，《中國臨床康復》2006年34期）。3-NPA預處理能誘導腦缺血耐受,其機制可能是上調GLUT1和GLUT3 mRNA及蛋白表達水平，維持腦組織的能量供給（陳為安,楊得獎,屈洋,張旭.3-硝基丙酸預處理對腦缺血耐受模型GLUT1和GLUT3表達的影響[J]，《中國病理生理雜志》2010年11期）。