[發明專利]一種米曲霉角蛋白酶基因及其表達載體與應用

有效

• 申請號: 202011186972.6
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112175977B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 李牧;杜蕓
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/57
• 分類號: C12N15/57;C12N9/62;C12N15/81;C12P21/06
• 代理公司: 成都坤倫厚樸專利代理事務所(普通合伙) 51247
• 代理人: 吳亦雨

本發明屬于基因工程技術領域，具體涉及一種米曲霉角蛋白酶基因及其表達載體與應用。具體技術方案為：一種角蛋白酶表達基因，其DNA序列如SEQ ID No：1所示。該基因表達了一種角蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。本發明提供了一種新的可表達角蛋白酶的基因資源，并將該基因與質粒結合，轉入菌株中生產角蛋白酶，豐富了角蛋白酶的來源。

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，具體涉及一種米曲霉角蛋白酶基因及其表達載體與應用。

背景技術

我國的畜禽資源極為豐富，年產羽毛約為200萬噸，其中大部分羽毛并未得到合理利用。如果直接將羽毛排放到環境中，不僅是巨大的浪費，還會造成污染。

將羽毛破碎形成的羽毛粉營養豐富，羽毛粉中粗蛋白質含量達80％以上。但與此同時，羽毛粉中富含角蛋白，難以被直接消化利用，從而降低了羽毛粉的飼用價值。角蛋白酶(Keratinase)是一種能夠降解角蛋白的蛋白酶類，能夠有效水解動物毛發、羽毛等富含角蛋白的原料，因而在飼料、皮革、醫藥業、食品等工業及環境治理方面具有廣闊的應用前景。但目前已報道的角蛋白酶較少，且酶活較低，難以規模化應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種米曲霉角蛋白酶及其表達菌株和應用。

為實現上述發明目的，本發明所采用的技術方案是：一種角蛋白酶表達基因，其DNA序列如SEQ ID No：1所示。

相應的，所述角蛋白酶表達基因表達的角蛋白酶。

相應的，一種角蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。

相應的，所述角蛋白酶表達基因在表達角蛋白酶中的應用，將所述角蛋白酶表達基因與質粒連接后，轉化到菌株中轉錄表達角蛋白酶。

優選的，啟動基因發生轉錄表達的啟動子為GAP啟動子。

優選的，含所述GAP啟動子的質粒為pGAPZ A、pGAPZ B、pGAPZ C和pGAPZα中的任意一種。

優選的，啟動基因發生轉錄表達的啟動子為甲醇啟動子。

優選的，含所述甲醇啟動子的質粒為pPIC9K。

相應的，所述基因表達的角蛋白酶在降解角蛋白中的應用。

本發明具有以下有益效果：本發明提供了一種新的可表達角蛋白酶的基因資源，并將該基因與質粒結合，轉入菌株中生產角蛋白酶，豐富了角蛋白酶的來源。

附圖說明

圖1為pGAPZA-AoKerase11酶連產物結構示意圖；

圖2為pPIC9K-AoKerase11酶連產物結構示意圖；

圖3為PCR驗證兩種重組的畢赤酵母表達菌株示意圖。

具體實施方式

本發明提供了一種新的基因資源：AoKerase11。其序列如SEQ ID No：1所示。該基因可表達角蛋白酶，所述角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。

下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。

實施例一：獲得可表達角蛋白酶的菌株