[發(fā)明專利]一種基于尼龍膜微萃取的紅花染色鑒別方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011180952.8
• 申請日: 2020-10-29
• 公開（公告）號: CN112505025B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設計）人: 劉象銀;范驍輝;王臣臣;程翼宇;王毅;李蕾;郭曉光;馬存德;李燕魁
• 申請（專利權）人: 山東丹紅制藥有限公司;浙江大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權代理有限公司 33224
• 代理人: 韓聰

本發(fā)明公開了一種基于尼龍膜微萃取的紅花染色鑒別方法，屬于中藥質量檢測領域。所述鑒別方法包括：(1)將待測紅花樣品浸泡于乙醇溶液中，靜置提取，收集提取液；(2)以尼龍膜作為萃取膜，將提取液濾過尼龍膜濾頭使其吸附提取液中的染料物質；(3)再將堿性水溶液濾過尼龍膜濾頭洗脫尼龍膜上吸附的染料物質，得到洗脫液，往洗脫液中加入同等濃度酸溶液回調pH，制得待檢液；(4)觀察待檢液的顏色是否無色透明，如是，則判斷待測紅花樣品未染色，如呈現(xiàn)顏色，則判斷待測紅花樣品染色。本發(fā)明采用尼龍膜能夠將染色劑從紅花乙醇浸提液中分離，可直接根據(jù)染料萃取液的顏色判斷紅花是否被染色，該方法簡單實用，適用于現(xiàn)場快速檢測。

技術領域

本發(fā)明屬于中藥質量檢測領域，具體涉及一種基于尼龍膜微萃取的紅花染色鑒別方法。

背景技術

紅花為菊科植物紅花的管狀花，具有活血化瘀、舒筋活絡、預防和治療心腦血管疾病等功效，是我國傳統(tǒng)的中藥材。近年來，紅花在臨床治療中大量應用，價格上漲，市場出現(xiàn)了染色的紅花以次充好，給用藥者帶來了極大的安全隱患。國家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)發(fā)布的《國家食品藥品監(jiān)督管理總局藥品檢驗補充檢驗方法和檢驗項目批準件》2013006號、2014016號分別涉及了金橙II等6種染色劑，以監(jiān)控紅花藥材的質量。

目前，紅花鑒別以人工鑒別為主，簡單的方法為取適量紅花放入杯中，加入適量的清水，放置一會，觀察顏色，若顏色呈金黃色，則沒有進行染色，若顏色呈紅色或鮮紅色，則是經(jīng)過了染色的紅花。

易紅兵介紹了一種染色紅花的快速鑒別方法，從形、色、氣味、水試幾個方面對染色紅花進行鑒別，紅花經(jīng)提取再染色后，雖然顏色與正品紅花相似，但仔細檢查發(fā)現(xiàn)花柱、花冠筒裂片。花藥各部位形狀卷曲不舒展、顏色模糊；正品紅花水浸液呈金黃色，染色樣品水浸液呈橙紅色且花很快褪色(《一種染色紅花的快速鑒別》，中國藥業(yè)，2012年，第21卷第4期)。

外形鑒別對鑒別人員專業(yè)要求高，且結果容易受到主觀因素和客觀環(huán)境的影響。由于天然紅花中富含羥基紅花黃色素，其水提液呈金黃色，僅靠水試視檢無法準確鑒別紅花是否染色。

如何將天然色素與染料區(qū)分，實現(xiàn)染料的提取分離，有利于準確鑒別紅花是否染色。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種能夠將染料成分從染色紅花中提取分離，與天然色素區(qū)分開，通過視檢法即可準確鑒別紅花是否染色。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種基于尼龍膜微萃取的紅花染色鑒別方法，包括以下步驟：

(1)將待測紅花樣品浸泡于乙醇溶液中，靜置提取，收集提取液；

(2)以尼龍膜作為萃取膜，將提取液濾過尼龍膜濾頭使其吸附提取液中的染料物質；

(3)再利用堿性水溶液濾過尼龍膜濾頭，洗脫濾頭上吸附的染料物質，得到洗脫液，往洗脫液中加入同等濃度酸溶液回調pH，制得待檢液；

(4)觀察待檢液的顏色是否無色透明，如是，則判斷待測紅花樣品未染色，如呈現(xiàn)顏色，則判斷待測紅花樣品染色。

所述染料為酸性染料，具體為金橙Ⅱ、檸檬黃、偶氮玉紅、日落黃、酸性紅73或胭脂紅。

本發(fā)明結合薄膜微萃取技術，將染色劑從紅花提取液中分離出來。研究表明，相較于混合纖維素膜(MCE)濾頭和聚醚砜膜(PES)濾頭，本發(fā)明采用的尼龍膜(Nylon)濾頭對上述染料吸附效果更優(yōu)，尼龍膜成分為聚酰胺，可充分吸附紅花中添加的酸性染料，而紅花提取液中的天然色素及其他分子則基本不會被膜吸附截留，然后利用堿性水溶液對酸性染料進行洗脫，從而實現(xiàn)便捷的提取分離。由于檢測對象是酸性染料，在堿性條件下染料溶液顏色會變淺，因此加酸調回pH以保證視檢靈敏度。

步驟(1)中，采用體積百分比為70％的乙醇溶液作為浸提液，物料比為1g：20mL，提取時間為5min。