[發(fā)明專利]銀環(huán)蛇咬傷豬模型的制備及用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011177432.1
• 申請日: 2020-10-29
• 公開（公告）號: CN112119978A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃智;廖明;何冬凌;張夢;莫財鋒;程曉陽;李亞蘭;宋鵬書
• 申請（專利權(quán)）人: 黃智
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61K49/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種銀環(huán)蛇咬傷豬模型的制備及用途，是將銀環(huán)蛇蛇毒凍干粉注射入豬肌肉內(nèi)，建立銀環(huán)蛇咬傷豬模型，彌補銀環(huán)蛇咬傷沒有實驗動物模型的不足。該模型貼近人類被銀環(huán)蛇咬傷的病程較長等特點，可以模擬銀環(huán)蛇咬傷的過程，可用于研究其發(fā)病的臨床表征、病理生理機制和精準(zhǔn)化治療，并可最終評價抗蛇毒血清和抗毒蛇咬傷藥物的療效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種銀環(huán)蛇咬傷豬模型的制備及用途。

背景技術(shù)

毒蛇咬傷（蛇傷）是被世界衛(wèi)生組織列為一個易忽視的重要的熱帶/亞熱帶疾病之一，全球每年約有500萬蛇傷事件發(fā)生，造成約2.5萬—12.5萬人死亡。我國每年蛇傷的患者達30萬人之多，死亡率為5%—10%，致殘或喪失勞動能力者占25%—30%，給家庭和社會帶來了極大的負擔(dān)。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國銀環(huán)蛇咬傷占各類毒蛇咬傷的8.12%，但死亡人數(shù)卻居蛇傷事件的首位。銀環(huán)蛇咬傷屬于急重癥，主要表現(xiàn)為嗜睡、運動神經(jīng)失調(diào)、瞳孔散大、局部無力、垂涎、惡心、嘔吐、昏迷、呼吸困難等癥狀，2-4小時內(nèi)可出現(xiàn)眼瞼下垂、吞咽苦難、肌無力等神經(jīng)麻痹癥狀，嚴(yán)重危及患者的生命安全。銀環(huán)蛇毒以神經(jīng)毒素為主，并且有神經(jīng)肌肉阻斷作用，引起橫紋肌遲緩性癱瘓，可導(dǎo)致外周型呼吸麻痹，是臨床上主蛇傷要致死原因。為準(zhǔn)確診斷、科學(xué)評價銀環(huán)蛇蛇傷的發(fā)展進程及生理病理變化，需要建立一種與銀環(huán)蛇咬傷病癥相似的動物模型，方能使研究更符合臨床實際情況，但目前尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)于銀環(huán)蛇咬傷動物模型制作的文獻。因此，亟待發(fā)明一種成熟穩(wěn)定的銀環(huán)蛇咬傷動物模型，為該疾病的防治研究提供直接、精準(zhǔn)的體內(nèi)證據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種銀環(huán)蛇咬傷豬模型的制備及用途，彌補銀環(huán)蛇咬傷沒有實驗動物模型的不足。有助于動態(tài)分析銀環(huán)蛇咬傷的發(fā)生發(fā)展進程，更貼近人類被銀環(huán)蛇咬傷的病理生理的動態(tài)過程，為研究銀環(huán)蛇咬傷的臨床表征、病理生理機制、精準(zhǔn)化治療、抗毒蛇咬傷藥物的篩選及抗蛇毒血清療效的評價等研究提供創(chuàng)新技術(shù)方法支撐。

銀環(huán)蛇咬傷豬模型的制作具體分為兩個步驟，1）探索豬肌肉注射銀環(huán)蛇蛇毒的MLD；（2）制備銀環(huán)蛇咬傷的豬模型。

優(yōu)選的，所述豬肌肉注射銀環(huán)蛇蛇毒的MLD 為50-70μg/kg，優(yōu)選為60μg/kg。

優(yōu)選的，所述制備銀環(huán)蛇咬傷的豬模型注射銀環(huán)蛇蛇毒的劑量為10-50μg/kg，優(yōu)選劑量為30μg/kg。

優(yōu)選的，所述制備銀環(huán)蛇咬傷的豬模型是將銀環(huán)蛇蛇毒凍干粉注射入豬腿部肌肉，72h不間斷觀察豬精神狀態(tài)、運動狀態(tài)、呼吸表現(xiàn)、口腔分泌物、眼瞼情況等生物學(xué)行為狀態(tài)，并結(jié)合白細胞計數(shù)（WBC）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs—CRP）、鉀離子（K⁺）、二氧化碳（CO₂）等血液指標(biāo)水平，再根據(jù)心臟、大腦的HE染色等病理檢查結(jié)果制備銀環(huán)蛇咬傷的豬模型。

本發(fā)明顯著兩個優(yōu)點：1. 本發(fā)明首次建立了一種銀環(huán)蛇咬傷動物模型方法，該模型具有成功率高、重復(fù)性強、病理改變穩(wěn)定等優(yōu)勢，且該模型與銀環(huán)蛇咬傷病癥極其相似，更貼近人類被銀環(huán)蛇咬傷的生理病理動態(tài)過程，能夠最大程度的符合臨床實際情況。2. 模型在研究銀環(huán)蛇咬傷的臨床表征、病理生理機制、精準(zhǔn)化治療、抗毒蛇咬傷藥物的篩選及抗蛇毒血清療效的評價研究等方面具有極大的應(yīng)用價值。

附圖說明

圖1：本發(fā)明實施例豬生理鹽水注射前后狀態(tài)對比圖。A1：豬生理鹽水注射前狀態(tài)；A2：豬生理鹽水注射后狀態(tài)。

圖2：本發(fā)明實施例豬銀環(huán)蛇毒注射前后狀態(tài)對比圖。B1：豬銀環(huán)蛇毒注射前狀態(tài)；B2：豬銀環(huán)蛇毒注射2h和后狀態(tài)。

圖3：本發(fā)明實施例生理鹽水組和銀環(huán)蛇毒組大腦HE染色結(jié)果。C1為注射生理鹽水豬的大腦HE染色病理圖片；C2為注射銀環(huán)蛇毒豬的大腦HE染色病理圖片。