[發明專利]一種檢測生物制品中異嗜性小鼠白血病病毒的方法有效
| 申請號： | 202011176128.5 | 申請日： | 2020-10-29 |
| 公開（公告）號： | CN112011648B | 公開（公告）日： | 2021-01-15 |
| 發明（設計）人： | 范培培 | 申請（專利權）人： | 蘇州良辰生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103 | 代理人： | 周敏 |
| 地址： | 215613 江蘇省蘇州市張家*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 生物制品 中異嗜性 小鼠 白血病病毒 方法 | ||
1.一種檢測生物制品中異嗜性小鼠白血病病毒的方法，其特征在于，以待檢測生物制品中的RNA為RNA模板，采用上游引物、下游引物和標記有熒光基團的探針進行熒光定量PCR反應，采集熒光信號以確定所述待檢測生物制品中的異嗜性小鼠白血病病毒的含量；其中，
所述上游引物的序列為cccttaaagataagattaaccc；
所述下游引物的序列為ctctccaagtaacattgaag；
所述探針的序列為cgttgtaccgaggctcctgc；
所述探針的序列的5’端修飾有熒光報告基團，3’端修飾有熒光淬滅基團；
所述的熒光報告基團為FAM；所述的熒光淬滅基團為TAMRA或BHQ。
2.根據權利要求1所述的檢測生物制品中異嗜性小鼠白血病病毒的方法，其特征在于，確定所述待檢測生物制品中的異嗜性小鼠白血病病毒的含量的方法為將采集的所述熒光信號代入標準曲線中進行確定，其中，所述標準曲線是以多個濃度的異嗜性小鼠白血病病毒RNA標準品作為RNA模板，采用所述上游引物、所述下游引物和所述探針對所述RNA模板進行熒光定量PCR反應，采集熒光信號后建立的。
3.根據權利要求2所述的檢測生物制品中異嗜性小鼠白血病病毒的方法，其特征在于，所述異嗜性小鼠白血病病毒RNA標準品的序列為cccuuaaagauaagauuaacccguggggcccccuaauaguuauggggaucuuggugagggcaggagccucgguacaacgugacagcccucaccagaucuucaauguuacuuggagag。
4. 根據權利要求2所述的檢測生物制品中異嗜性小鼠白血病病毒的方法，其特征在于，所述多個濃度的RNA標準品的濃度分別為2×10 copies/μL、2×102 copies/μL、2×103copies/μL、2×104 copies/μL、2×105 copies/μL、2×106 copies/μL、2×107 copies/μL、2×108 copies/μL、2×109copies/μL中的多個。
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