[發明專利]一種慢病毒載體、構建方法及其應用有效
| 申請號： | 202011175991.9 | 申請日： | 2020-10-28 |
| 公開（公告）號： | CN112011574B | 公開（公告）日： | 2021-01-15 |
| 發明（設計）人： | 楊興林;潘謳東;賈國棟;楊佳麗;楊蕊菊;夏清梅 | 申請（專利權）人： | 和元生物技術（上海）股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/867 | 分類號： | C12N15/867;C12N5/10;C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 陸惠中;田歡 |
| 地址： | 201321 上海市浦東新區中國(上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 病毒 載體 構建 方法 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種慢病毒載體的制備方法，其特征在于，包括：
以基于LTR1.27-GEW質粒為骨架，在5’端添加R和U5區，同時刪除3’端的PBS序列，并且將其中的5’CMV啟動子更換為獼猴免疫缺陷病毒的U3啟動子，得到慢病毒載體Obio-02。
2.根據權利要求1所述的方法得到的慢病毒載體。
3.一種細胞，其特征在于，所述細胞通過權利要求2所述的慢病毒載體感染得到。
4.一種制備病毒產品的方法，其特征在于，將細胞與有效量的權利要求2所述的慢病毒載體接觸，以產生病毒產品。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，包括：
S1、將包含權利要求2所述的慢病毒載體共轉染細胞；S2、收獲病毒；S3、將上清液分離得到病毒產品。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟S2包括：轉染45-50小時后，第一次收獲病毒，收集培養基并給細胞更換新鮮的完全培養基；轉染70-75小時后，第二次收獲病毒，收集培養基，丟棄細胞。
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