[發(fā)明專利]抑郁癥肝郁脾虛證疾病小鼠的造模方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011174816.8
• 申請日: 2020-10-28
• 公開（公告）號: CN112106729A
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發(fā)明（設計）人: 童萍;卜平;董麗平
• 申請（專利權(quán)）人: 童萍
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 揚州市錦江專利事務所 32106
• 代理人: 江平

抑郁癥肝郁脾虛證疾病小鼠的造模方法，涉及抑郁癥的研究技術(shù)領(lǐng)域，對健康小鼠施行28天連續(xù)刺激，每種刺激平均使用4次，刺激種類為：禁水斷食24h刺激、夾尾1min刺激、10℃冰水游泳5min刺激、1次/s頻率的水平搖晃持續(xù)5min刺激、燈光照射24h刺激、飽和水濕墊料24h刺激或持續(xù)24h傾斜鼠籠45°刺激中的任意一種；自以上連續(xù)刺激的第15天開始到第28天，每天還對小鼠灌胃濃度為15%（wt）的大黃粉水懸液0.5mL。取得的模型小鼠具備了抑郁癥肝郁脾虛證的癥狀學表現(xiàn)，可作為抑郁癥肝郁脾虛證的病機、治療的進一步研究。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抑郁癥的研究技術(shù)領(lǐng)域，特別是疾病的動物的造模技術(shù)。

背景技術(shù)

抑郁癥是一種嚴重的情感性精神障礙，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在全世界范圍內(nèi)，抑郁癥的患病率高達10%左右，其終身患病率高達20%；抑郁癥自殺率高，一半以上的抑郁癥患者曾有過“自殺”的念頭，每年因抑郁癥自殺死亡的人數(shù)超過100萬。較高的發(fā)病率、致殘率和自殺率給家庭和社會帶來嚴重影響。而且抑郁癥發(fā)病率有逐年增高的趨勢。

抑郁癥治療的療效不佳。只有不足50%的患者在標準的抗抑郁治療中獲益，約70%左右的患者仍殘留部分癥狀。這可能是由抑郁癥是一種高度異質(zhì)性的疾病，診治過程忽略了癥狀的差異性導致，抑郁癥臨床癥狀個體差異大，癥狀的差異性影響了治療的結(jié)局。在對853例抑郁癥患者的癥狀組合的研究中發(fā)現(xiàn)，存在119中癥狀的不同組合，說明抑郁癥不是單一的疾病過程，而是累及多系統(tǒng)、多器官的全身性疾病，其病理過程十分復雜，涉及炎癥反應、內(nèi)分泌代謝紊亂、氧化應激、神經(jīng)遞質(zhì)異常等，然而，抑郁癥治療的效果不理想，診療的個體化及獨特的癥狀的識別與預后有關(guān)。中醫(yī)的辨證是結(jié)合體征、癥狀與脈象、舌象等多方面信息進行辨別診治的過程，研究發(fā)現(xiàn)，不同證型的疾病，需要根據(jù)個體的差異進行有針對性的治療。

傳統(tǒng)醫(yī)學“辯證論治”的原則強調(diào)疾病的個體差異。肝郁脾虛、心脾兩虛、氣滯血瘀、肝郁氣滯、心腎不交、肝郁痰阻是抑郁癥的六個主要中醫(yī)證型，其中肝郁脾虛證的出現(xiàn)頻度最高。陳珍貴等進行的流行病學調(diào)查，得出抑郁癥肝郁脾虛證的診斷標準為：情緒抑郁、悲觀厭世、善嘆息、倦怠乏力、納差、形體消瘦、脈細，如以上七項中具備四項，即肝郁兩項（情緒抑郁必備）、脾虛兩項者。因此，結(jié)合中醫(yī)的不同證型為抑郁癥患者提供符合其病、證特點的個體化治療是精準化醫(yī)療的發(fā)展趨勢。

動物模型是研究抑郁癥發(fā)病機制的重要手段，而目前鮮有對抑郁癥“病證”結(jié)合的疾病模型的研究。目前，有關(guān)抑郁癥不同中醫(yī)證型的動物模型大都借用抑郁癥的造模方法，即西醫(yī)“病”的造模方式，往往通過觀察總結(jié)中醫(yī)證型或根據(jù)中藥治療效果反推可能的證型，存在滯后性和缺乏特異性，導致研究結(jié)果的不一致和不確定性，影響了基礎(chǔ)研究的臨床轉(zhuǎn)化。

良好信、效度的疾病動物模型是研究結(jié)果能夠從實驗室順利向臨床轉(zhuǎn)變的重要保證。西醫(yī)研究中根據(jù)病因、病理來構(gòu)造抑郁癥的動物模型，其信、效度均較高，但卻忽略了動物的個體差異，在造模過程中強調(diào)“病”的模型的構(gòu)造，弱化了“證”型的構(gòu)造，病證結(jié)合動物模型是現(xiàn)階段比較理想的動物模型。

發(fā)明內(nèi)容

基于“病證結(jié)合”的理論原則，為了克服目前抑郁癥肝郁脾虛證動物模型的不足，本發(fā)明目的在于構(gòu)建一種穩(wěn)定且信、效度高的一種抑郁癥肝郁脾虛證疾病小鼠的造模方法，以供基礎(chǔ)研究使用。

本發(fā)明技術(shù)方案是：對健康小鼠施行28天連續(xù)刺激，每種刺激平均使用4次，刺激種類為：禁水斷食24h刺激、夾尾1min刺激、10℃冰水游泳5min刺激、1次/s頻率的水平搖晃持續(xù) 5min刺激、燈光照射24h刺激、飽和水濕墊料24h刺激或持續(xù)24h傾斜鼠籠45°刺激中的任意一種；自以上連續(xù)刺激的第15天開始到第28天，每天還對小鼠灌胃濃度為15%（wt）的大黃粉水懸液0.5mL。

本發(fā)明基于“病證結(jié)合”的理論，本發(fā)明參照慢性不可預知溫和應激和大黃灌胃法，利用CUMS建立了抑郁癥模型，同時，采用大黃灌胃的方法建立了肝郁脾虛證模型，新建立的模型需同時具備抑郁癥和肝郁脾虛證的表現(xiàn)。