[發(fā)明專利]一種蠟樣芽胞桿菌噬菌體及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011167577.3
• 申請(qǐng)日: 2020-10-27
• 公開（公告）號(hào): CN114480299B
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丁郁;李淳;王涓;吳清平;袁曉鳴;李娜;韋獻(xiàn)虎;楊小鵑
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué);廣東省微生物研究所（廣東省微生物分析檢測(cè)中心）
• 主分類號(hào): C12N7/00
• 分類號(hào): C12N7/00;A23L3/3571;A61K35/76;A61P31/04;C12R1/92
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文

本發(fā)明涉及芽胞桿菌技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種噬菌體及其應(yīng)用，本發(fā)明的噬菌體為蠟樣芽胞桿菌噬菌體(Bacillus?cereus?bacteriophage)，所述蠟樣芽胞桿菌噬菌體(Bacillus?cereus?bacteriophage)已于2020年9月18日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號(hào)為GDMCC?61196?B1。本發(fā)明的噬菌體對(duì)攜帶多重毒力基因和多重耐藥性的蠟樣芽胞桿菌具有特異性裂解效果，同時(shí)具有良好的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、離子濃度和有機(jī)溶劑耐受性，本發(fā)明的噬菌體可作為單一抑菌制劑或組合其他病原菌噬菌體構(gòu)成抑菌制劑用于抑制蠟樣芽胞桿菌的生長(zhǎng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及芽胞桿菌技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種蠟樣芽胞桿菌噬菌體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蠟樣芽胞桿菌是一種產(chǎn)芽胞的革蘭氏陽性條件致病菌，廣泛分布于環(huán)境中。作為最重要的食源性致病菌之一，蠟樣芽胞桿菌已被發(fā)現(xiàn)存在于各類食品中，如米、面等主食，以及奶與奶制品、蔬菜、水產(chǎn)品和速凍食品等。蠟樣芽胞桿菌產(chǎn)生的芽胞是高度耐熱的休眠體，能夠耐受普通的食品加工溫度，因此加劇了蠟樣芽胞桿菌的傳播和污染風(fēng)險(xiǎn)。在世界各地，每年都有大量因蠟樣芽胞桿菌污染導(dǎo)致的食品中毒事件的爆發(fā)。蠟樣芽胞桿菌也是我國(guó)常見食源性致病菌，在我國(guó)致病菌導(dǎo)致的食物中毒事件排名中位列第三，危害嚴(yán)重。食源性蠟樣芽胞桿菌的常見感染癥狀為腹瀉和嘔吐，主要由能夠產(chǎn)生腹瀉型毒素和嘔吐型毒素的蠟樣芽胞桿菌所導(dǎo)致。腹瀉型毒素包括溶血性腸毒素(HBL)、非溶血性腸毒素(NHE)、腸毒素FM(EntFM)和細(xì)胞毒素K(CytK)，會(huì)引起腹瀉、腹痛或其他類型的皮膚感染。而致嘔型蠟樣芽胞桿菌分泌的嘔吐毒素在具有高毒力的同時(shí)也具有高度的耐熱性和耐酸性，使其難以在食品加工過程中失活，從而引起急性嘔吐等癥狀。此外，部分蠟樣芽胞桿菌還可能攜帶炭疽毒素，造成類似炭疽芽胞桿菌感染等更為嚴(yán)重的潛在風(fēng)險(xiǎn)。目前應(yīng)對(duì)蠟樣芽胞桿菌污染的有效方法還是抗生素治療，但由于蠟樣芽胞桿菌基因組已可編碼β內(nèi)酰胺酶，能夠天然耐受大多數(shù)β內(nèi)酰胺類抗生素。此外，由于抗生素的濫用，能夠抵抗多種抗生素的多重耐藥菌已經(jīng)出現(xiàn)，使得抗生素治療在應(yīng)對(duì)耐藥性蠟樣芽胞桿菌感染時(shí)無法取得滿意的治療效果，甚至完全失效。因此，尋求其他更為合理的治療方法變得迫在眉睫。

相比于抗生素療法，噬菌體對(duì)細(xì)菌的殺滅效果具有高度特異性，減小了治療過程對(duì)其他微生物的影響，有利于維持機(jī)體微生態(tài)環(huán)境的平衡。同時(shí)噬菌體能夠與宿主細(xì)菌共同進(jìn)化，有助于應(yīng)對(duì)細(xì)菌產(chǎn)生的抗性問題。此外，通過組合不同類型和宿主范圍的噬菌體，可以配制噬菌體組合劑(或噬菌體雞尾酒)，擴(kuò)大噬菌體的應(yīng)用范圍，或?qū)⑹删w與抗生素聯(lián)用，提高治療效果。由于多重耐藥性蠟樣芽胞桿菌的出現(xiàn)和快速發(fā)展，作為抗生素的替代療法之一，噬菌體治療越來越受到廣泛關(guān)注。目前能夠特異性裂解多重耐藥性蠟樣芽胞桿菌的噬菌體仍較為有限。同時(shí)，蠟樣芽胞桿菌豐富的遺傳多樣性也使得單獨(dú)一種或幾種特異性噬菌體無法滿足殺滅蠟樣芽胞桿菌的需求。

因此，亟需一種特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性高的蠟樣芽胞桿菌噬菌體及包含該蠟樣芽胞桿菌噬菌體的抑菌制劑和噬菌體組合物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處而提供一種蠟樣芽胞桿菌噬菌體及其應(yīng)用，本發(fā)明的噬菌體對(duì)攜帶多重毒力基因和多重耐藥性的蠟樣芽胞桿菌具有特異性裂解效果，同時(shí)具有良好的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、離子濃度和有機(jī)溶劑耐受性，可作為單一抑菌制劑或噬菌體組合劑成分用于抑制食品與臨床中蠟樣芽胞桿菌的生長(zhǎng)。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

本發(fā)明的第一目的提供了一種噬菌體，將噬菌體命名為蠟樣芽胞桿菌噬菌體(Bacillus?cereus?bacteriophage)DLc1，所述蠟樣芽胞桿菌噬菌體(Bacillus?cereusbacteriophage)DLc1已于2020年9月18日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，地址：中國(guó)廣州市先烈中路100號(hào)廣東省微生物研究所，保藏編號(hào)為GDMCC?61196-B1。