[發明專利]新型冠狀病毒SARS-CoV-2的檢測蛋白組及應用

在審

• 申請號: 202011165862.1
• 申請日: 2020-10-27
• 公開（公告）號: CN112666348A
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發明（設計）人: 仝舟;高山;楊勃;張德梅;張智超;閆紅
• 申請（專利權）人: 山西高等創新研究院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 北京知鯤知識產權代理事務所(普通合伙) 11866
• 代理人: 李光平

1.一種新型冠狀病毒SARS-CoV-2的檢測蛋白組，其特征在于，包括：

(1)、氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的N蛋白，和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的S蛋白RBD 331aa-532aa區域；

(2)、如(1)中所述的氨基酸序列中經過至少一個氨基酸的取代、缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白質。

2.一種與權利要求1所述的蛋白組相關的生物材料，其特征在于，包括如下任意一種：

a1、編碼權利要求1所述的蛋白組的基因；

a2、含有a1中所述的基因的表達盒；

a3、含有a1中所述的基因或a2中所述的表達盒的重組載體；

a4、含有a1中所述的基因、a2中所述的表達盒或a3中所述的重組載體的微生物。

3.根據權利要求2所述的生物材料，其特征在于，編碼權利要求1所述的蛋白組的基因如下任意一種：

b1、N蛋白的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，S蛋白RBD 331aa-532aa區域的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

b2、與b1中的基因序列具有85％以上的同源性，且能夠編碼權利要求1所述的蛋白組。

4.權利要求1中所述的蛋白組或權利要求2或3所述的生物材料在制備檢測新型冠狀病毒SARS-CoV-2的產品中的用途；

可選的，所述的產品為引物、探針或試劑盒。

5.一種新型冠狀病毒SARS-CoV-2的酶聯免疫吸附檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1中所述的蛋白組。

6.根據權利要求5所述的新型冠狀病毒SARS-CoV-2的酶聯免疫吸附檢測試劑盒，其特征在于，包括：含3-5wt％脫脂奶粉的磷酸鹽吐溫緩沖液、包被液、封閉液、顯色劑、終止液、空白對照、陰性對照、陽性對照或二抗中的至少一種；

可選的，封閉液為含5wt％脫脂奶粉的磷酸鹽吐溫緩沖液；

可選的，顯色劑為3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶液；

可選的，空白對照為含3wt％脫脂奶粉的磷酸鹽吐溫緩沖液；

可選的，陰性對照為使用3wt％脫脂奶粉的磷酸鹽吐溫緩沖液稀釋10000倍的無關抗體；

可選的，陽性對照為使用3wt％脫脂奶粉的磷酸鹽吐溫緩沖液稀釋10000倍的新型冠狀病毒單抗；

可選的，二抗為山羊抗兔IgM、山羊抗兔IgG、山羊抗人IgM或山羊抗人IgG。

7.一種新型冠狀病毒SARS-CoV-2的酶聯免疫吸附檢測方法,其特征在于，包括如下步驟:

S1：使用純化后的N蛋白和S蛋白RBD 331aa-532aa區域制備預包被新冠病毒抗原的包被板；

S2：在包被板中分別加入待測樣品、陰性對照、陽性對照和空白對照，進行一抗孵育，并洗板；

S3：在包被板中分別加入山羊抗兔IgM、山羊抗兔IgG、山羊抗人IgM和山羊抗人IgG進行二抗孵育，并洗板；

S4：加顯色劑顯色后，加入終止液，讀板。