[發明專利]一種檢測L-CRMP4的雙抗體夾心化學發光免疫檢測試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 202011157134.6
• 申請日: 2020-10-26
• 公開（公告）號: CN112410306B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 高新
• 申請（專利權）人: 廣州仕韞生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

本發明公開了一種用于檢測L?CRMP4的雙抗體夾心化學發光免疫檢測試劑盒及其應用。所述的試劑盒中含有由保藏編號為CCTCC?NO：C2019240和CCTCC?NO：C2019238的雜交瘤細胞株分泌產生的抗L?CRMP4的單克隆抗體Ab1和Ab2。本發明以Ab1單克隆抗體為捕獲抗體，以辣根過氧化物酶標記的Ab2單克隆抗體為檢測抗體，建立了檢測L?CRMP4的雙抗體夾心化學發光免疫檢測方法。這兩種抗體能結合人L?CRMP4的不同表位，形成雙抗體夾心模式，實現不同樣本中L?CRMP4的定量檢測，快速、穩定、特異性好、靈敏度高。對前列腺癌的診斷、治療和愈后評估具有重要的指導意義，具有推廣應用價值。

技術領域

本發明屬于生物檢測領域，具體涉及一種檢測L-CRMP4的雙抗體夾心化學發光免疫檢?測試劑盒及其應用。

背景技術

前列腺癌(Prostate?cancer,PCa)已成為泌尿男性生殖系統發病率和死亡率最高、增長率?最快的惡性腫瘤。腫瘤轉移和去勢抵抗是前列腺癌患者死亡的最主要原因。早期局限性前列?腺癌經根治術切除、根治性放療或其它治療方法可達到治愈效果，10年生存率近98.5％。雄?激素剝奪治療(androgen?deprivation?therapy,ADT)是晚期前列腺癌和初始治療失敗患者的主要治療方法，早期對絕大多數患者治療敏感。但大部分患者在2～3年后失去對ADT的治療?反應，進展為去勢抵抗性前列腺癌(castration-resistantprostate?cancer,CRPC)。前列腺癌在其?病程的早期即可以發生微轉移，而不是只有腫瘤突破包膜才開始向全身進展。因此，前列腺?的早期診斷具有重要的臨床意義。

目前，前列腺癌篩查應用最廣泛的指標是前列腺特異性抗原(Prostate-specificantigen,?PSA)。PSA僅由前列腺腺上皮細胞分泌，具有前列腺器官特異性但無腫瘤特異性，良惡性疾?病均可導致PSA升高。盡管如此，因缺乏高特異性、高靈敏度的前列腺癌篩查標記物，PSA?目前仍廣泛用于老年男性人群前列腺的篩查,但由于準確性差，導致大量人群接受不必要前列腺穿刺并造成低危前列腺癌患者過度診斷和過度治療的窘境。

此外，術前以PSA、Gleason評分(Gleason?Score，GS)及臨床TNM分期建立的前列腺癌風險評估不能準確反映前列腺癌患者轉移傾向及早期微轉移。根據Epstein標準，對于臨床?意義的前列腺癌，當PSA在10～20ng/ml之間時，陽性檢出率約為42％；在20～49.9ng/ml之?間，陽性檢出率約為55.3％；在50～99.9ng/ml之間，陽性檢出率約為55.3％；當100ng/ml?時，陽性檢出率約為97.7％。PSA在4～10ng/ml時，前列腺穿刺活檢的陽性率為25.5％；PSA?在10～20ng/ml時，前列腺穿刺活檢的陽性率為34.9％。因此，建立早期準確診斷前列腺癌、?預測前列腺癌轉移和去勢抵抗進展的評估方法能夠指導早期治療，早期對高風險轉移進展患?者進行干預，有利于改善患者生存時間和生活治療及愈后評估。

研究發現前列腺患者血液人長鏈坍塌反應調節蛋白-4(Long-collapsinresponse?mediator?protein-4，L-CRMP4)水平與轉移和去勢抵抗存在密切相關。早期前列腺癌與前列腺增生患者?的血液中L-CRMP4的表達在統計學有顯著差異(P0.01)；局限前列腺癌、轉移性前列腺癌?和CRPC血液中L-CRMP4的表達在統計學也有顯著性差異(P0.05)，是一種很有潛力和應?用推廣空間的前列腺癌早期診斷指標和愈后評估指標。