[發明專利]一種制備舍莫瑞林的方法

有效

• 申請號: 202011152644.4
• 申請日: 2020-10-26
• 公開（公告）號: CN112175066B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 陳鵬;陶偉鋒;甘立新;虞仲良;朱志敏;呂建國
• 申請（專利權）人: 浙江蘇泊爾制藥有限公司
• 主分類號: C07K14/60
• 分類號: C07K14/60;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 紹興市越興專利事務所(普通合伙) 33220
• 代理人: 蔣衛東

1.一種制備舍莫瑞林的方法，其特征在于：一個9肽片段與一個20肽片段樹脂固相縮合得到29肽樹脂，將該29肽樹脂經裂解反應獲得舍莫瑞林粗品，再提純后獲得舍莫瑞林純品；所述9肽片段為A1，所述20肽片段樹脂為B1，所述29肽樹脂為A1-B1；其中：A1:R-Tyr(tBu)-Ala-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-OH；B1:Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Gly-Gln(Trt)-Leu-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Ile-Met-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-樹脂；A1-B1:R-Tyr(tBu)-Ala-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Val-Leu-Gly-Gln(Trt)-Leu-Ser(Ψ(Me,Me)Pro)-Ala-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Ile-Met-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-樹脂；所述R為Boc或Fmoc；所述A1的合成步驟為： (1)采用固相合成方法，縮合試劑存在的條件下，在A固相樹脂載體上由碳端向氮端逐一偶聯若干保護氨基酸，所述若干保護氨基酸依次為Fmoc-Asn(Trt)-Ser(Ψ(Me，Me)Pro)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH和R-Tyr(tBu)-OH，得到R-Tyr(tBu)-Ala-Asp(OtBu)-Ala-Ile-Phe-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ser(Ψ(Me，Me)Pro)-樹脂； (2)使用裂解試劑脫除樹脂，將A1樹脂裂解反應液加入醚類溶劑中沉降，得到A1；其中，所述裂解試劑為1％-50％的TFE/二氯甲烷溶液，裂解所需的反應時間為20-240分鐘；所述醚類溶劑為乙醚、異丙醚和甲基叔丁基醚中任意一種，所述醚類溶劑用量為裂解反應液用量的4-6體積倍量，沉降所需的溫度為10-30℃；所述B1的合成步驟為： (1)采用固相合成方法，縮合試劑存在的條件下，在B固相樹脂載體上由碳端向氮端逐一偶聯若干保護氨基酸，所述若干保護氨基酸依次為Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-Ser(Ψ(Me，Me)Pro)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH； (2)脫除Fmoc保護基，得到B1。

2.根據權利要求1所述的一種制備舍莫瑞林的方法，其特征在于：所述29肽樹脂中，R保護基為Boc時，R保護基的脫除在樹脂裂解反應中同步脫除；R保護基為Fmoc時，先脫除R保護基，再進行樹脂裂解反應，得到舍莫瑞林粗肽；所述裂解試劑由三氟乙酸、水、苯酚、苯甲硫醚、三異丙基硅烷、1,2-乙二硫醇和DL-二硫蘇糖醇中的任意3-5個組份組成，其中三氟乙酸≥80％，其它組份各為1％-5％；裂解反應時間為0.5-3小時，溫度為10-30℃，醚類溶劑為乙醚、異丙醚和甲基叔丁基醚中的任意一種，醚類溶劑用量為裂解試劑用量的4-6體積倍量。

3.根據權利要求1所述的一種制備舍莫瑞林的方法，其特征在于：所述A固相樹脂載體為2-氯三苯甲基氯樹脂，樹脂替代度范圍為0.1-1.6mmol/g。

4.根據權利要求1所述的一種制備舍莫瑞林的方法，其特征在于：所述B固相樹脂載體為MBHA樹脂或AM樹脂，樹脂替代度范圍為0.1-1.2mmol/g。