[發(fā)明專(zhuān)利]一種楊梅實(shí)生無(wú)性系的建立方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011152166.7 | 申請(qǐng)日： | 2020-10-23 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112106663B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-08-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王鵬凱;郄紅麗;黃穎宏 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 江蘇省太湖常綠果樹(shù)技術(shù)推廣中心 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | A01H4/00 | 分類(lèi)號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京申云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱興天 |
| 地址： | 215107 江蘇*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 楊梅 無(wú)性 建立 方法 | ||
1.一種楊梅實(shí)生無(wú)性系的建立方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)選取處于硬核期未成熟的楊梅果實(shí)，去除果肉和果核殼，取出種子，滅菌消毒備用；
2)無(wú)菌條件下將種子去除種皮，保留種仁；
3)將種仁接種于基本培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)；
4)將在基本培養(yǎng)基上膨大變綠的種仁轉(zhuǎn)移至分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得分化的材料，所述分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚乙酸+0 .5mg/L TDZ+0 .5mg/L赤霉素；
5)將分化的材料接種于不定芽誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得分化的不定芽，每30天繼代一次，所述不定芽誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚丁酸+0 .5mg/L 6-BA+0.3mg/L赤霉素；
6)將分化的不定芽逐個(gè)分開(kāi)，接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)生根，即得楊梅實(shí)生無(wú)性系，所述生根培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚丁酸+0 .5mg/L赤霉素；
其中，步驟3）和步驟4中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂；
步驟5)中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+40g/L蔗糖+5g/L瓊脂；
步驟6)中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+20g/L蔗糖+5g/L瓊脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述楊梅實(shí)生無(wú)性系的建立方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)選取處于硬核期未成熟的楊梅果實(shí)，去除果肉和果核殼，取出種子，滅菌消毒備用；
2)無(wú)菌條件下將種子去除種皮，保留種仁；
3)將種仁接種于基本培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)21天；
4)將在基本培養(yǎng)基上膨大變綠的種仁轉(zhuǎn)移至分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)40天獲得分化的材料，所述分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚乙酸+0 .5mg/L TDZ+0 .5mg/L赤霉素；
5)將分化的材料接種于不定芽誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)60天獲得分化的不定芽，每30天繼代一次，所述不定芽誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚丁酸+0 .5mg/L 6-BA+0.3mg/L赤霉素；
6)將分化的不定芽逐個(gè)分開(kāi)，選取長(zhǎng)度1 .5-2cm的不定芽接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)30天，即得楊梅實(shí)生無(wú)性系，所述生根培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+0 .5mg/L吲哚丁酸+0 .5mg/L赤霉素；
其中，步驟3）和步驟4中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂；
步驟5)中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+40g/L蔗糖+5g/L瓊脂；
步驟6)中，基本培養(yǎng)基為：WPM+100mg/L硫酸銨+40mg/L氯化鈣+20g/L蔗糖+5g/L瓊脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一所述的楊梅實(shí)生無(wú)性系的建立方法，其特征在于，步驟1)中，所述的滅菌消毒具體為：用洗潔精清洗并流水輕緩沖洗2h，然后于超凈工作臺(tái)中用70％乙醇振蕩浸泡30s，再用0 .1％升汞振蕩浸泡8-10min，無(wú)菌水沖洗5次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一所述的楊梅實(shí)生無(wú)性系的建立方法，其特征在于，步驟3)～6)培養(yǎng)條件為：光照強(qiáng)度為2000lx，光照時(shí)間16小時(shí)/天，培養(yǎng)溫度26℃，培養(yǎng)基pH5 .7～5.8。
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