[發明專利]ASTE1在檢測食管鱗癌中的應用

有效

• 申請號: 202011144323.X
• 申請日: 2020-10-23
• 公開（公告）號: CN112213487B
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 王立東;雷玲玲;宋昕;趙學科;徐瑞華;范宗民;伊力亞爾·夏合丁;毛偉敏;王獻增
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第一附屬醫院;新疆醫科大學第一附屬醫院;浙江省腫瘤醫院;林州市人民醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/564;G01N33/58;G01N33/543;C12Q1/6851;C12Q1/6886
• 代理公司: 鄭州翊博專利代理事務所(普通合伙) 41155
• 代理人: 付紅莉

本發明屬于生物醫學和分子生物學技術領域，涉及ASTE1在制備食管鱗癌檢測試劑盒中的應用。本發明利用基因芯片試劑盒建立無癥狀人群與食管鱗癌組織間的差異基因表達譜，用實時定量PCR技術衡量無癥狀人群、食管鱗癌組織中ASTE1mRNA的水平，用雙夾心ELISA法檢測無癥狀人群和食管鱗癌患者血清樣本中ASTE1的含量。結果證實ASTE1可作為一種新的食管鱗癌的血清標志物，可進一步制備檢測食管鱗癌的ELISA診斷試劑盒，為術前或早期食鱗癌的診斷提供重要參考信息。

技術領域

本發明屬于生物醫學和分子生物學技術領域，具體涉及ASTE1在檢測食管鱗癌中的應用。

背景技術

全球每年新增約50萬例食管癌患者中，一半以上發生在中國，河南省林州市是中國，也是世界上食管癌發病率和死亡率最高的地區，比西方國家的發病率高100倍，目前食管癌仍然是該地區腫瘤相關主要死亡原因。由于早期患者缺乏特異癥狀，首次就診時90%左右為中晚期，中晚期患者5年生存率僅10%左右，所以食管癌患者預后差。但是，早期食管癌患者的5年生存率可達90%左右。故篩選和建立用于大范圍人群早期發現和食管癌診斷指標和方法，是提高食管癌早期發現率，從而降低死亡率的關鍵。

ASTE1基因位于染色體3q22.1，有704個氨基酸，編碼小行星同源蛋白1，可能通過與果蠅小行星基因的序列相似性在表皮生長因子受體(EGFR)信號傳導中發揮作用，即在細胞間通訊、細胞命運和增殖中具有重要作用的復雜途徑。ASTE1沒有原發性疾病相關突變的報道，但近年報道ASTE1與結直腸癌的發生密切相關，但其在食管鱗癌中發揮的生物學功能尚無報道。

發明內容

本發明的目的在于提供食管鱗癌相關血清標志物ASTE1蛋白在制備食管鱗癌檢測試劑盒中的應用，相應地，還提供了能夠特異性檢測ASTE1表達水平的分子在制備食管鱗癌檢測試劑盒中的應用。

基于上述目的，本發明采用如下技術方案：

能夠特異性檢測ASTE1表達水平的分子在制備食管鱗癌檢測試劑盒中的應用。

上述應用中，能夠特異性檢測ASTE1表達水平的分子為核酸或蛋白質。

ASTE1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，ASTE1蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

上述應用中，能夠特異性檢測ASTE1表達水平的核酸為引物。

上述應用中，檢測ASTE1表達水平的引物包括正向引物和逆向引物，所述正向引物為：5’-GAGTTCTTCACTGATTTGAAGTTGC-3’；所述逆向引物為：5’-TTGTAAGCTTTTTATCTGAAATGTC-3’。

上述應用中，能夠特異性檢測ASTE1表達水平的蛋白質為抗體。

作為另一個請求保護的主題，ASTE1蛋白在制備食管鱗癌檢測試劑盒中的應用。

將ASTE1蛋白用于制備食管鱗癌檢測試劑盒，所述檢測是指通過酶聯免疫吸附法（ELISA）進行的檢測。

作為另一個請求保護的主題，一種用于食管鱗癌檢測的試劑盒為ELISA試劑盒，試劑盒包括固相載體和包被于固相載體上的腫瘤相關抗原ASTE1蛋白。

進一步地，試劑盒還包括樣品稀釋液、第二抗體、第二抗體稀釋液、陰性對照血清、陽性對照血清、洗滌液、顯色液和終止液。

進一步地，陽性對照血清為ASTE1陽性對照血清；陰性對照血清為ASTE1陰性對照血清。

與現有技術相比，本發明的有益效果如下：