[發明專利]一種合成On-DNA二氫吡唑化合物的方法

在審

• 申請號: 202011142976.4
• 申請日: 2020-10-23
• 公開（公告）號: CN112920245A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 李進;高森;杜甜;伍榮峰;劉觀賽;萬金橋
• 申請（專利權）人: 成都先導藥物開發股份有限公司
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C07H1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種合成On-DNA二氫吡唑化合物的方法，其特征在于：該方法是以On-DNA α,β-不飽和羰基化合物和肼類化合物為原料，反應得到On-DNA產物；其中On-DNA α,β-不飽和羰基化合物的結構式為肼類化合物的結構式為R₆-NHNH₂；

其中，結構式中DNA包含由人工修飾的和/或未修飾的核苷酸單體聚合得到的單鏈或雙鏈的核苷酸鏈，該核苷酸鏈通過一個或多個化學鍵或基團與化合物中剩余部分相連；

R₁選自分子量1000以下與DNA和羰基碳原子直接相連的基團或不存在；

R₂選自分子量1000以下與烯基碳原子直接相連的基團；

R₃選自分子量1000以下與DNA和烯基碳原子直接相連的基團或者不存在；

R₄選自分子量1000以下與羰基碳原子直接相連的基團；

R₅選自氫或分子量1000以下與碳原子直接相連的基團；

R₆選自氫或分子量1000以下與氮原子直接相連的基團；

或R₅分別與R₁、R₂、R₃或R₄成環。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述R₁、R₂、R₃、R₄分別選自烷基、取代烷基、羧基、5～10元芳基、取代5～10元芳基、5-10元芳雜環基、取代5-10元芳雜環基；其中，所述烷基為C₁～C₂₀烷基或C₃～C₈環烷基；取代烷基的取代基的數量為一個或多個；取代烷基的取代基是相互獨立的選自鹵素、羧基、硝基、烷氧基、鹵代苯基、苯基、烷基苯基、雜環基中的一種或多種；取代5～10元芳基的取代基的數量為一個或多個，取代5～10元芳基的取代基是相互獨立的選自鹵素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一種或多種；取代5-10元芳雜環基的取代基的數量為一個或多個，取代5-10元芳雜環基的取代基是相互獨立的選自鹵素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一種或多種；

所述R₅、R₆分別選自氫、C₁～C₂₀烷基。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：向摩爾當量為1，摩爾濃度為0.5-5mM的On-DNA α,β-不飽和羰基化合物溶液中，加入10～1000倍摩爾當量的肼類化合物，在10℃～100℃下反應0.5～24小時至反應結束。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述反應在溶劑中進行，溶劑為水、甲醇、乙醇、乙腈、二甲亞砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、無機鹽緩沖液、有機酸緩沖液、有機堿緩沖液中任意一種或幾種的含水混合溶劑。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述反應溶劑為硼酸緩沖液，硼酸緩沖液的pH為7～11。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述反應的反應溫度為20℃、30℃、40℃、50℃或60℃。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述反應的反應時間為1小時、2小時、4小時、6小時、8小時、12小時或16小時。

8.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述方法中On-DNA α,β-不飽和羰基化合物的摩爾當量為1，肼類化合物的摩爾當量為50當量、100當量、200當量、300當量、400當量、500當量、600當量、800當量、1000當量。