[發明專利]一種β-煙酰胺單核苷酸溶液的制備及純化方法

在審

• 申請號: 202011141680.0
• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112225759A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 閔令濤
• 申請（專利權）人: 閔令濤
• 主分類號: C07H1/00
• 分類號: C07H1/00;C07H1/02;C07H1/06;C07H19/048
• 代理公司: 上海大為知衛知識產權代理事務所(普通合伙) 31390
• 代理人: 何銀南

1.一種β-煙酰胺單核苷酸溶液的制備及純化方法，其特征在于，用煙酰胺核糖鹽通過磷酸化反應得到煙酰胺單核苷酸鹽，然后在酸性條件下酸化得到β-煙酰胺單核苷酸溶液；將經過預處理的上述溶液用膜濃縮設備先后進行微濾和納濾，然后將獲得的初步產物pH值調至3～7，進樣上反相高效液相色譜制備柱，固定相為硅膠，流動相A為鹽酸或醋酸，流動相B為乙醇，進行梯度洗脫純化，得到純化產物；將純化產物用膜濃縮設備進行納濾后，用真空冷凍機凍干，獲得純化的煙酰胺單核苷酸。

2.根據權利要求1所述的β-煙酰胺單核苷酸溶液的制備及純化方法，其特征在于，具體的步驟為，

(1)在pH 7.5～10的堿性水溶液中，反應體系溫度為35～40℃條件下，將摩爾比為1:1～1.5的煙酰胺核糖鹽與偏磷酸鹽進行磷酸化反應2～2.5h，得到煙酰胺單核苷酸鹽；

(2)向煙酰胺單核苷酸鹽中加酸，調節pH值至1～4，將煙酰胺單核苷酸鹽酸化形成β-煙酰胺單核苷酸溶液；

(3)將上述β-煙酰胺單核苷酸溶液用膜濃縮設備先后進行微濾和納濾，用于微濾的中空纖維膜孔徑為0.02μm～0.1μm，用于納濾的納濾膜孔徑為0.1～0.5nm，收集所得溶液；

(4)將收集的溶液pH值調至1～5，進樣上反相高效液相色譜制備柱，固定相為四十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相A為鹽酸或醋酸，流動相B為乙醇，進行梯度洗脫純化，得到純化的β-煙酰胺單核苷酸溶液；

(5)將純化的β-煙酰胺單核苷酸溶液溶液用膜濃縮設備進行納濾后，用真空冷凍干燥機凍干，獲得純化的β-煙酰胺單核苷酸。