[發明專利]一種用于降血糖的SOD脂質體及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202011138358.2
• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112121155A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 劉樹滔;劉航琪;郭靜科
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61K9/127;A61P3/10;A61P1/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

本發明公開了一種用于降血糖的SOD脂質體及其制備方法與應用。本發明通過對SOD、卵磷脂和膽固醇進行制備得到的SOD脂質體，其平均粒徑范圍為100~400 nm，表面電荷范圍在?10~?50mV。糖尿病患者每日服用本發明之藥物后，可對腸道氧化應激有明顯的抗氧化作用，有效降低血糖，降低糖化白蛋白、胰島素抵抗指數、胰高血糖素，提高AMPK并改善血脂水平，有效修復結腸上皮細胞，減少炎性細胞浸潤，修復腸道損傷，明顯減少內毒素的全身性流入并降低炎癥因子水平。

技術領域

本發明涉及一種用于降血糖的SOD脂質體及其制備方法與應用，屬于生物技術領域。

背景技術

氧化應激在糖尿病及其并發癥發生和發展過程中發揮著重要作用，抗氧化劑能穩定或清除自由基，保護細胞和器官組織，使機體免受自由基誘導損傷。

根據來源不同，抗氧化劑可分為天然抗氧化劑和合成抗氧化劑。人體內的抗氧化系統又分為酶途徑和非酶途徑。常見的酶途徑抗氧化物質有超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GPx），過氧化氫酶（CAT）等，非酶途徑抗氧化物質包括維生素A、C、E，谷胱甘肽，α-硫辛酸，類胡蘿卜素，皂苷類，類黃酮，褪黑色素等抗氧化物質以及植酸、維生素B族等輔助因子。

超氧化物歧化酶（SOD）是重要的抗氧化劑，它的分布極為廣泛，迄今為止已從細菌、真菌、藻類、魚類、昆蟲、植物和哺乳類動物等各種生物體內分離得到。已經證明，SOD的存在可保護多種類型的細胞免受自由基的損害、衰老。SOD還可以保護細胞免受DNA損傷、脂質過氧化、電離輻射損傷、蛋白質變性和許多其他形式的漸進性細胞降解。目前，國內已開發和正在開發的SOD資源有牛血、豬血、豬肝。不少植物中SOD含量亦很豐富，如刺梨、麥葉、辣椒、種子、果實、蔬菜等。

機體處于正常情況下，組織細胞中的自由基清除系統可以及時清除自由基，使自由基的生成和降解處于動態平衡。在機體處于病理情況下，由于活性氧（ROS）生成增多或者機體抗氧化能力降低，便會形成氧化應激。大量的研究表明，糖尿病會導致氧化應激增加，產生過量超氧陰離子自由基（），使機體的抗氧化防御機制受損。SOD是細胞內專一清除氧自由基的酶，它能促使變為H₂O₂和O₂，使細胞免受損傷。

SOD口服一直成為學術界關注的熱點。口服SOD主要存在以下幾個難點：胃液酸破壞、胃蛋白酶水解、腸粘膜吸收困難等。為了解決這個問題，本申請采用與生物膜雙脂層結構十分相似的物質-脂質體將SOD包埋制成脂質體SOD（L-SOD）；而且L-SOD具有類脂質結構、對皮膚黏膜具有高度親和力，因此能很好地附著在表皮和生物膜（包括細胞膜）上。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于降血糖的SOD脂質體及其制備方法與應用，解決了口服SOD具有胃液酸破壞、胃蛋白酶水解、腸粘膜吸收困難等問題。

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種用于降血糖的SOD脂質體，所述的SOD脂質體原料組成為：Cu/Zn SOD、大豆卵磷脂和膽固醇，三者質量之比為1:4:1。所述SOD脂質體平均粒徑范圍為100~400 nm；表面電荷呈負性，范圍在-10~-50mV。

SOD脂質體的制備方法：按比例稱取大豆卵磷脂和膽固醇于離心管中避光保存；稱取Cu/Zn SOD于離心管中，加入0.2 M、pH7.4的PB緩沖液輕輕搖勻，獲得0.005 g/ml SOD溶液；將SOD溶液的3倍體積乙醚和SOD溶液倒入裝有膽固醇和卵磷脂的離心管內，輕輕振蕩搖勻后放入超聲波振蕩器中超聲5分鐘，接著將超聲后的溶液倒入茄形瓶中，40℃避光旋轉蒸發10分鐘、充分去除乙醚；將所得的乳濁液，10000 g·min^-1，離心5 min，棄去下層未形成脂質體的脂質殘塊，取上清即得到SOD脂質體。制作好的SOD脂質體放入4℃冰箱保存。