[發明專利]CRISPR系統及其在制備TTN基因突變的擴張型心肌病克隆豬核供體細胞中的應用

有效

• 申請號: 202011137413.6
• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112522260B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 牛冬;汪滔;陶裴裴;王磊;曾為俊;程銳;馬翔;趙澤英;劉璐;黃彩云
• 申請（專利權）人: 南京啟真基因工程有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;C12N15/62;C12N15/12;C12N5/10
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 何葉喧

1.一種sgRNA，其靶序列結合區如SEQ?ID?NO：7中第1-20位核苷酸所示。

2.一種質粒，其轉錄得到權利要求1所述sgRNA。

3.一種試劑盒，包括權利要求1所述sgRNA或權利要求2所述質粒；所述試劑盒的用途為如下(a)或(b)或(c)：(a)制備重組細胞；(b)制備擴張型心肌病豬模型；(c)制備擴張型心肌病豬細胞模型。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括質粒pKG-GE3；質粒pKG-GE3如SEQ?ID?NO：2所示。

5.權利要求1所述sgRNA或權利要求2所述質粒在制備試劑盒中的應用；所述試劑盒的用途為如下(a)或(b)或(c)：(a)制備重組細胞；(b)制備擴張型心肌病豬模型；(c)制備擴張型心肌病豬細胞模型。

6.兩種質粒在制備試劑盒中的應用；

所述兩種質粒為權利要求2所述的質粒和SEQ?ID?NO：2所示的質粒pKG-GE3；

所述試劑盒的用途為如下(a)或(b)或(c)：(a)制備重組細胞；(b)制備擴張型心肌病豬模型；(c)制備擴張型心肌病豬細胞模型。

7.權利要求1所述sgRNA或權利要求2所述質粒或權利要求3所述試劑盒或權利要求4所述試劑盒的應用，為如下(a)或(b)或(c)：(a)制備重組細胞；(b)制備擴張型心肌病豬模型；(c)制備擴張型心肌病豬細胞模型。

8.一種制備重組細胞的方法，包括如下步驟：將權利要求2所述質粒和權利要求4中所述的質粒pKG-GE3共轉染豬細胞，得到TTN基因發生突變的重組細胞。