[發(fā)明專利]一種羥基酪醇對小鼠急性心肺損傷保護作用的方法

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• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112245413A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 彭美玉
• 申請（專利權(quán)）人: 濰坊醫(yī)學院
• 主分類號: A61K31/05
• 分類號: A61K31/05;A61K31/704;A61P9/00;A61P11/00
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 史云聰

1.一種羥基酪醇對小鼠急性心肺損傷保護作用的方法，其特征在于：包括以下實驗原料：小鼠若干(長沙市天勤生物技術(shù)有限公司)，LPS藥劑(上海滬鼎生物科技有限公司)，HYD試劑(桂林益天成生物科技有限公司)，GA甘草酸(湖北信康醫(yī)藥化工有限公司)和生理鹽水(上海一研生物科技有限公司)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羥基酪醇對小鼠急性心肺損傷保護作用的方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1、實驗分組：小鼠在實驗室環(huán)境中飼養(yǎng)一周后對小鼠進行分組，按照隨機原則分成正常組、模型組、預(yù)防組、單一治療組和雙重治療組；

S2、實驗建模：模型組、預(yù)防組、單一治療組和雙重治療組進行LPS藥劑注射，用碘伏消毒小鼠腹部皮膚，用棉花擦除碘伏，按照5mg/KG小鼠體重的劑量對小鼠腹腔注射LPS藥劑，LPS藥劑濃度為0.5mg/mL，正常組按照與其他小組LPS劑量相同的劑量注射生理鹽水，預(yù)防組在進行LPS給藥前按照1-3mg/KG小鼠體重的劑量對小鼠投喂HYD試劑2天；

S3、小鼠處理：正常組小鼠在注射生理鹽水后按照飼喂標準正常投喂，模型組小鼠在注射LPS后按照飼喂標準正常投喂，預(yù)防組小鼠在注射LPS后按照飼喂標準正常投喂，同時停止投喂HYD，單一治療組在注射LPS10-20min后對小鼠進行灌胃給藥一次，按照10-20mg/KG體重的劑量灌胃HYD，雙重治療組在注射LPS10-20min后對小鼠進行灌胃給藥一次，按照10-20mg/KG體重的HYD劑量和30-50mg/KG體重的GA劑量對小鼠進行灌胃，同時對建模后的各組小鼠進行肺泡灌洗，灌洗液于-20℃保存；

S4、實驗分析a：各組建模24h后對小鼠進行超聲心動檢測，觀察并記錄各組左心室功能的變化情況，獲取左心室二維圖像和M型超聲心動圖，測量計算后得出左心室的EF和FS；

S5、實驗分析b：各組建模24h后對小鼠進行麻醉，取右肺中葉，測量肺系數(shù)，切片后同時用HE進行染色，觀察小鼠肺組織病理學變化情況；

S6、實驗分析c：各組小鼠灌洗液進行離心處理，去除灌洗液中的炎癥細胞，離心10-16min后取上清液進行TNF-α、IL-6、IL-1β、cox-2和HMGB-1蛋白表達進行檢測，同時對小鼠心臟組織提取RNA，采用Real-time PCR法檢測各組表達差異；

S7、小鼠處理：實驗完成后對小鼠進行分類凍存于-80℃并向，并統(tǒng)一進行無害焚化處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種羥基酪醇對小鼠急性心肺損傷保護作用的方法，其特征在于：小鼠實驗前進行篩選，選取成年雄性小鼠，取6-8周齡，體重為19-23g進行實驗。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種羥基酪醇對小鼠急性心肺損傷保護作用的方法，其特征在于：小鼠建模注射過程中在5min內(nèi)完成，全程無菌作業(yè)，使用一次性耗材，避免因操作導(dǎo)致實驗各組模型差異。