[發(fā)明專(zhuān)利]一種以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記及其檢測(cè)方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011135079.0
• 申請(qǐng)日: 2020-10-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112094924A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王大林;謝紅濤;董續(xù)加;岳君;金樁;田佳迎;楊國(guó)俊;劉永剛;廖柱
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 海南羅牛山種豬育種有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京睿博行遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11297
• 代理人: 龔家驊

1.一種以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記，其特征在于：所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記，其特征在于：所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的PCR擴(kuò)增的特異引物包含第一引物，所述的第一引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記，其特征在于：所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的PCR擴(kuò)增的特異引物包含第二引物，所述的第二引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

4.一種權(quán)利要求1所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的檢測(cè)方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)從豬耳組織中提取基因組DNA，根據(jù)豬MYST2基因序列和所述的兩條遺傳標(biāo)記特異引物，用該兩條引物在豬基因組DNA中進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到PCR產(chǎn)物；

(2)將步驟(1)中得到的PCR產(chǎn)物用PstI限制性?xún)?nèi)切酶酶切，在2％的含有溴化乙錠的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)酶切結(jié)果，凝膠成像系統(tǒng)觀察并記錄基因型；根據(jù)條帶差異，可分為三種基因型，具有282bp、164bp兩條帶的是AA型，只有446bp一條帶的是BB型，同時(shí)具有446bp、282bp、164bp三條帶的是AB型。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的檢測(cè)方法，其特征在于：在步驟(1)中，所述的PCR程序?yàn)椋?4℃4min，35個(gè)循環(huán)94℃ 50s，58℃ 45s，72℃ 50s，然后72℃ 10min，最后4℃終止反應(yīng)，PCR反應(yīng)體系為：2.0μL DNA(100ng)，2.5μL 2mM mixed dNTPs，2.5μL 10×Taq DNA polymerase buffer，2.5μL 25mMMgCl₂，1μL 20μM第一引物，1μL 20μM第二引物，2unit of Taq DNA polymerase(1U/μL)，11.5μL無(wú)菌水。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記的檢測(cè)方法，其特征在于：在步驟(2)中，所述的PCR產(chǎn)物PstI酶切反應(yīng)體系為：10μL PCR產(chǎn)物，7μL無(wú)菌水，1μL Pst I(10U),2μL10×buffer，PCR產(chǎn)物PstI酶切反應(yīng)條件為：混合物在37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h。

7.權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的以MYST2基因作為大白豬瘦肉率和平均日增重的遺傳標(biāo)記在長(zhǎng)大的二元母豬產(chǎn)仔數(shù)性狀標(biāo)記輔助選擇中的應(yīng)用。