[發明專利]一種固定化酶、其制備方法及卡洛芬對映體的拆分方法

在審

• 申請號: 202011132026.3
• 申請日: 2020-10-21
• 公開（公告）號: CN112175935A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 張盼良;陳婧;孫碧珠;孫晨蕊;唐課文
• 申請（專利權）人: 湖南理工學院
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/02;C12P41/00;C12P17/10
• 代理公司: 合肥市科融知識產權代理事務所(普通合伙) 34126
• 代理人: 黃珍麗

1.一種固定化酶，其特征在于，包括：

南極假絲酵母脂肪酶；以及金屬有機框架化合物，用作為所述南極假絲酵母脂肪酶的固定化載體；所述南極假絲酵母脂肪酶通過表面吸附法固定于所述金屬有機框架化合物的表面上。

2.根據權利要求1所述的一種固定化酶，其特征在于，所述金屬有機框架化合物為沸石咪唑骨架材料。

3.一種如權利要求1~2中任一項所述的固定化酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

取金屬有機框架化合物作為固定化載體；

將南極假絲酵母脂肪酶添加至緩沖液中后，再與金屬有機框架化合物進行混合分散，控制反應體系溫度攪拌一定時間后得到分散液；

將分散液進行過濾后，再經干燥處理，得到所述固定化酶。

4.根據權利要求3所述的一種固定化酶的制備方法，其特征在于，所述步驟中，南極假絲酵母脂肪酶與金屬有機框架化合物的體積質量比以mL/mg計為4:(50~800)，緩沖液pH控制在4.5~9.5，反應溫度控制在0~50℃，反應時間控制在2~48小時。

5.一種如權利要求3或4所述制備方法制得的固定化酶。

6.一種卡洛芬對映體的拆分方法，其特征在于，包括以下步驟：

以外消旋卡洛芬酯為反應底物，以如權利要求1~2、5中任一項所述的固定化酶為催化劑；

通過所述固定化酶選擇性催化外消旋卡洛芬酯進行水解反應。

7.根據權利要求6所述的一種卡洛芬對映體的拆分方法，其特征在于，所述拆分方法具體包括以下步驟：

以緩沖溶液為反應介質，將緩沖溶液與外消旋卡洛芬酯進行混合后，再加入所述固定化酶進行水解反應。

8.根據權利要求7所述的一種卡洛芬對映體的拆分方法，其特征在于，所述步驟中，緩沖溶液為磷酸緩沖溶液，其pH為4.5~9.5。

9.根據權利要求7所述的一種卡洛芬對映體的拆分方法，其特征在于，所述步驟中，水解反應的溫度為30~90℃，反應時間為1~48h。

10.根據權利要求7所述的一種卡洛芬對映體的拆分方法，其特征在于，所述步驟中，每毫升緩沖溶液中，外消旋卡洛芬酯的添加量為0.001~0.1mmol，所述固定化酶的添加量為5~150mg。