[發明專利]一組用于診斷特發性膜性腎病的微生物標志物組合及其應用

在審

• 申請號: 202011130811.5
• 申請日: 2020-10-21
• 公開（公告）號: CN114381532A
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 張森;李昭君;王偉達;陳園園;吳海杰
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥物研究所
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;G01N33/569
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物醫學領域，公開了一組用于診斷特發性膜性腎病的微生物標志物及其應用，具體涉及腸道微生物標志物在特發性膜性腎病診斷中的應用，本發明通過對特發性膜性腎病受試者的糞便樣本進行16S rRNA測序，首次發現了19類微生物組合體與特發性膜性腎病相關，提示可以通過檢測19類微生物的豐度實現特發性膜性腎病的早期診斷。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，公開了一組用于診斷特發性膜性腎病的微生物標志物及其應用，具體涉及腸道微生物標志物在特發性膜性腎病診斷中的應用。

背景技術

膜性腎病是一種臨床多發難治性腎小球疾病，臨床突出表現為“三高一低”，即高度水腫，高蛋白尿，高脂血癥，低蛋白血癥。其病理特征為彌漫性腎小球基底膜(glomerularbasement membrane，GBM)增厚及免疫復合物沉積。近幾年相關研究數據表明，膜性腎病的發病率有明顯上升趨勢，且逐漸趨于年輕化。其中約80％的病例為腎局限性(特發性膜性腎病，IMN)，而另外20％與其他全身性疾病或暴露有關(繼發性膜性腎病)。

這里要提到的特發性膜性腎病(IMN)是一種獨特的腎臟特異性自身免疫性腎小球疾病，是成人腎病綜合征最常見的病因，也是終末期腎病(End stage of renal disease,ESRD)的主要可識別病因之一。大多數IMN是由M型磷脂酶A2受體抗體(抗磷脂酶A2受體)(85％)、含有7A 的血小板反應蛋白1型結構域(THSD7A)(3％–5％)或其他尚未確定的機制(10％)所介導的。目前針對特發性膜性腎病的早期診斷并不十分容易，除了結合生化和免疫性指標外，腎臟穿刺取腎臟組織進行病理檢測和IgG免疫熒光診斷，對確診也非常必要，這對患者會造成較大的身體創傷和腎臟損傷。IMN的治療主要采用免疫抑制劑治療，副作用較大，預后較差，缺乏有效的治療藥物和診斷治療手段。因此，建立特發性膜性腎病的疾病診斷模型迫在眉睫，這對膜性腎病的早期發現，早期診斷和及時治療意義重大。

存在于人胃腸道中的數萬億細菌-腸道微生物群與人類的健康密切相關，它們與宿主處于共生關系，具有調節免疫，物質代謝，宿主防御，生物屏障等多種功能。因此腸道菌群紊亂影響著多種疾病的發展，如肥胖，癌癥，心血管疾病和腎臟疾病等。眾多證據表明慢性腎病中腸道菌群發生紊亂，腸-腎軸理論的提出更好的解釋了腸道微生物與腎臟疾病的相互作用。

隨著多種技術的應用以及研究的深入，基于腸道微生態特征建立模型作為診斷疾病的工具逐漸被報道和認可。腸道微生物的個體差異性提示腸道菌具有良好的診斷和預警作用。目前針對特發性膜性腎病的腸道微生物早期診斷模型還未被報道，因此尋找特發性膜性腎病早期診斷的微生物標志物具有重大意義。

發明內容

為了彌補現有技術的不足，本發明提供了一種用于區別、鑒定特發性膜性腎病的腸道微生物組合體標志物，有19種微生物組成，通過檢測19種腸道微生物的豐度水平，可以實現特發性膜性腎病的早期診斷。

本發明經過廣泛而深入的研究，通過收集特發性膜性腎病人的糞便樣本，分析16S測序結果，首次發現了Paraprevotella,Barnesiella,Faecalibacterium,Negativibacillus,Coprobacter, Romboutsia,Roseburia,Ralstonia,Butyricimonas,Parabacteroides,,Allisonella,Bacteroides, Butyricicoccus,Actinomyces,Intestinibacter,Alistipes,unidentified Prevotellaceae,Odoribacter,Citrobacter這19類微生物在特發性膜性腎病樣本中相對豐度存在顯著差異(P0.05)，說明了這19類微生物組合體可作為特發性膜性腎病早期診斷的微生物標志物。發現該微生物組合體的試驗設計思路見圖1所示；所有入組特發性膜性腎病患者和健康對照人群的基本生理指標見表2.

表1. 19類菌屬拉丁文名稱對應的中文名稱。