[發明專利]無菌工藝模擬試驗方法

在審

• 申請號: 202011130303.7
• 申請日: 2020-10-21
• 公開（公告）號: CN112301091A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 劉冰;王鑫;陳磊
• 申請（專利權）人: 杭州精合醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/22
• 分類號: C12Q1/22;C12R1/125;C12R1/445;C12R1/725;C12R1/685;C12R1/385
• 代理公司: 深圳驛航知識產權代理事務所(普通合伙) 44605
• 代理人: 孫小丁

本發明提供一種無菌工藝模擬試驗方法，所述方法包括如下步驟：培養基促生長能力試驗；灌裝用具的無菌效果檢測；灌裝環境參數的監測；以及執行干預模擬試驗。上述無菌工藝模擬試驗方法，適用于細胞制劑生產，模擬試驗設計合理、試驗結果準確。

技術領域

本發明涉及醫藥生物技術領域，特別涉及一種無菌工藝模擬試驗方法。

背景技術

隨著《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》(以下簡稱規范)的推行，規范及附錄中要求無菌制劑生產企業需要開展無菌工藝模擬試驗，以保障無菌制劑產品在生產過程中的無菌水平，確保無菌制劑產品的安全性。為此，國家藥監局還發布了《無菌工藝模擬試驗指南(無菌制劑)》。由此可見，無菌工藝模擬試驗的重要性。

目前，行業中無菌工藝模擬試驗通常采用培養基模擬灌裝方法，該方法工藝成熟，但其僅適用于小容量注射劑、小容量凍干劑、大容量輸液制劑等無菌工藝，而對于細胞制劑(制劑)目前卻沒有相適配的無菌工藝模擬試驗方法。因此，有必要提供一種適用于細胞制劑、設計合理的無菌工藝模擬試驗方法。

發明內容

鑒于上述狀況，有必要提供一種適用于細胞制劑、設計合理的無菌工藝模擬試驗方法，以解決現有技術的不足。

本發明提供一種無菌工藝模擬試驗方法，所述方法包括如下步驟：培養基促生長能力試驗；灌裝用具的無菌效果檢測；灌裝環境參數的監測；以及執行干預模擬試驗。

進一步地，所述培養基促生長能力試驗包括如下步驟：培養基的選取、配制及滅菌；培養基陽性對照取樣和培養基陰性對照取樣；以及培養基對照培養及試驗結果判定。

進一步地，所述培養基為胰蛋白胨大豆肉湯培養基。

進一步地，所述培養基陽性對照取樣包括如下步驟：在生物安全柜中，用移液槍抽取一定量的對照培養基，無菌分裝于無菌試管中，再分別接入促生長能力試驗使用的菌種。

進一步地，所述促生長能力試驗使用的菌種包括枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、及銅綠假單胞菌。

進一步地，所述灌裝用具的無菌效果檢測，在灌裝的不同階段在隔離器中對細胞制劑生物制品灌裝用具進行無菌檢驗，通過無菌檢驗的結果來判斷灌裝用具是否染菌以及在哪個階段染菌。

進一步地，所述灌裝環境參數包括內部粒子數、浮游菌數、塵埃粒子數。

進一步地，所述執行干預模擬試驗包括如下步驟：執行干預動作；干預動作后留存PE管并進行培養，模擬罐裝用培養基的靈敏度測定；以及PE管密封性檢測。

進一步地，所述干預動作包括灌裝前后將物品傳入隔離器；(向隔離器中)放置浮游菌和沉降菌平皿；延長PE管(在隔離器中)的暴露時間(即模擬忘記蓋蓋的動作)；手套從暴露的移液槍頭上方越過；更換灌裝用移液槍；移液槍頭多次使用；移液槍頭接觸PE管外壁或隔離器操作臺面至少一次后仍繼續使用；移液槍頭盒倒扣在操作臺面使得移液槍頭散落在操作臺面仍然繼續使用；用手分離槍頭和移液槍后手未消毒而灌裝下一個PE管；雙手打開PE管；灌裝過程PE管中培養基灑出，清理結束后繼續灌裝；灌裝過程，關閉隔離器一定時間。

進一步地，所述PE管密封性檢測的步驟為，在培養后的陰性的留存PE管中隨機抽取多支，將其放入濃度為100CFU/ml的金黃色葡萄球菌的細菌溶液中浸泡，若培養后的PE管無菌體生長則PE管密封性良好，若培養后的PE管有菌體生長則PE管密封性不好、存在染菌風險。

本發明的技術方案帶來的有益效果是：上述無菌工藝模擬試驗方法，適用于細胞制劑生產，模擬試驗設計合理、試驗結果準確。

附圖說明

圖1是本發明實施例的無菌工藝模擬試驗方法的流程圖。

圖2是本發明實施例的培養基促生長能力試驗步驟的流程圖。