[發明專利]含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體及其應用

在審

• 申請號: 202011129375.X
• 申請日: 2020-10-21
• 公開（公告）號: CN112251422A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發明（設計）人: 謝為博
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C07K19/00;C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 樊戎;馮超

1.一種含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體，其特征在于：所述轉座酶復合體為由寡聚核苷酸接頭和轉座酶組裝形成的復合體；其中，

寡聚核苷酸接頭的第一鏈內含有一個UMI標簽序列，

或，含有多個依次連接的UMI標簽序列組成UMI復合標簽序列且UMI標簽序列為一種或多種，

或，含有多個由間隔序列分隔的UMI標簽序列組成UMI復合標簽序列且UMI標簽序列為一種或多種；其中，間隔序列由長度為0～20bp的可替換的非隨機的序列組成，GC含量為25％-75％。

2.根據權利要求1所述含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體，其特征在于：所述寡聚核苷酸接頭的第一鏈從5′端到3′端依次包括通用接頭序列、間隔序列、UMI標簽序列/UMI復合標簽序列、間隔序列、條碼序列和ME序列；

所述寡聚核苷酸接頭的第二鏈為包含ME序列的互補序列。

3.根據權利要求2所述含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體，其特征在于：所述通用接頭序列為10-50bp且序列中，GC含量為25％-75％；

UMI標簽序列為2-100bp的序列，條碼序列為0-100bp的序列，ME序列為用于與轉座酶結合的序列。

4.根據權利要求3所述含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體，其特征在于：所述通用接頭序列為含有“TTCCGATCT”的序列。

5.根據權利要求4所述含獨特分子標簽序列的轉座酶復合體，其特征在于：所述寡聚核苷酸接頭的第一鏈的表達式為：

[]TTCCGATCT{}AGATGTGTATAAGAGACA，

其中，[]TTCCGATCT為通用接頭序列，其長度為10～50個核苷酸；{}為UMI標簽序列或UMI復合標簽序列，

若{}為UMI標簽序列，其長度為2～50個核苷酸；

或，若{}為UMI復合標簽序列，其長度為4～50個核苷酸；

為條碼序列，其長度為0～50個核苷酸；

AGATGTGTATAAGAGACA為ME序列。