[發明專利]一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器及其使用方法

在審

• 申請號: 202011128688.3
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112300910A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 邵建寧;張文奇;麻和平;劉彩云;王潔;彭章普
• 申請（專利權）人: 甘肅省科學院生物研究所
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/22;C12M1/20;C12M1/12;C12M1/00;C12Q1/20
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

本發明公開了一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器及其使用方法，所述培養皿分區器由固定環和連接在固定環上的分區板構成的分區輪，和固定環內布滿1.5μm微孔的微孔中心管組合而成。該培養皿分區器實現了對抑菌樣品的過濾處理，并且實現了一次同一培養皿中進行抑菌物質對不同指示菌的抑菌性能判斷和檢測，有效節省操作時間，提高了廣譜抑菌試驗效率。適用于抗生素、細菌素、中藥提取物等的廣譜抑菌物質篩選和廣譜抑菌性能研究。

技術領域

本發明屬于微生物實驗工具領域，具體涉及一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器及其使用方法。

背景技術

在生產、科研中抑菌試驗常用的抑菌圈法又叫擴散法，是利用待檢品在瓊脂培養基內擴散作用，使瓊脂培養基上特定試驗菌生長受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈，根據抑菌圈有無及大小判斷和檢測待檢品抑菌性能及抑菌效價的一種方法。

現有技術中，測定抑菌圈使用最多的主要有紙片法、牛津杯法和打孔法，常用于抗生素、細菌素產生菌的分離篩選、效價測定，中藥材提取物抑菌性能等研究，進行抑菌物質的廣譜抑菌性能檢測。但是上述方法測定時，每個平板實驗僅能檢測抑菌物質對單一菌株的抑菌性能，導致抑菌試驗周期長，工作量大，效率低下。目前尚無一次同一平板同時對多種指示菌的抑菌性能進行分析和檢測的廣譜抑菌試驗解決方案。

發明內容

本發明為克服現有技術的不足和缺陷，提出一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器。

本發明的目的一是提供一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器，所述培養皿分區器由微孔中心管和分區輪構成，具體結構如下：

分區輪由處于圓心位置的上下兩個固定環和至少2個均勻分布的、一端連接于固定環外側直立的分區板構成，分區輪的直徑與所配用的培養皿皿底內徑相同，分區輪高度小于對應的培養皿皿底深度2 -5 mm，分區輪由硬性耐高溫材料制成；微孔中心管為一側壁布滿孔徑不大于1.5 μm微孔的圓管，微孔中心管套放于固定環內，高度不小于分區輪高度。整個分區器表面光滑。

作為優選，所述分區板的數量為6個。

作為優選，所述分區輪由不銹鋼或耐高溫塑料制成。

作為優選，所述微孔中心管由玻璃砂芯或醋酸纖維素或聚偏氟乙烯制成。

本發明的目的二提供一種輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器的使用方法，具體步驟如下：

（1）制備分區培養基

a.制備底層培養基：無菌培養皿中注入熱融的瓊脂培養基，隨即放置所述分區輪，瓊脂培養基均勻攤布，底層表面平整，放置在水平臺面上冷卻凝固，作為底層培養基；

b.制備分區菌層培養基：將微孔中心管放置在固定環中后，各個分區中分別加入等量48℃～52℃含不同指示菌適宜瓊脂培養基，均勻攤布，菌層表面平整，培養基液面不沒過分區輪，放置在水平臺面上冷卻凝固；

（2）加入試驗抑菌物質樣品：待步驟（1）培養皿各個分區中含不同指示菌適宜瓊脂培養基冷卻凝固后，在微孔中心管中加入一定量試驗抑菌物質樣品液體溶液；

（3）培養及判斷：將步驟（2）添加完試驗抑菌物質樣品的培養皿，置于培養箱中一定溫度培養一定時間后，觀察各個分區有無抑菌扇環形成，判斷試驗抑菌物質廣譜抑菌效果，并根據扇環半徑初步判斷抑菌物質樣品對不同指示菌抑菌性能的高低。

作為優選，所述步驟（c）中培養的溫度為20℃～42℃，培養時間為12 -36 h。

本發明提供的輻射狀廣譜抑菌試驗培養皿分區器主要用于產抑菌物質菌株發酵培養液、中藥材提取液直接檢測廣譜抑菌性能，微孔中心管采用微孔設計避免了繁雜的前期樣品處理，特別是產抑菌物質菌株發酵培養液中的菌體無需離心或過濾去除。