[發明專利]一株白色桿菌及其在防治玉米莖基腐病中的應用

有效

• 申請號: 202011128100.4
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112226387B
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發明（設計）人: 周方園;劉梅;趙曉燕;吳曉青;周紅姿;張新建;張廣志;范素素;王加寧
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所（山東省科學院中日友好生物技術研究中心）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P3/00;C12R1/01
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 于曉曉

1.一株白色桿菌（Leucobactersp.）M6560，其特征在于，所述白色桿菌M6560在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏編號為CGMCC No.20598，保藏日期為2020年9月4日，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

2.權利要求1中所述白色桿菌M6560在防治玉米莖基腐病中的應用，其特征在于，所述玉米莖基腐并是由串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme）引起的。

3.一種用于防治玉米莖基腐病的產品，其特征在于，活性成分包括權利要求1所述白色桿菌M6560的細胞懸浮液，有效活菌數為10^8-10 CFU/mL。

4.根據權利要求3所述的用于防治玉米莖基腐病的產品，其特征在于，所述白色桿菌M6560的細胞懸浮液制備方法為：

（1）將白色桿菌M6560大豆酪蛋白瓊脂培養基培養物接種于大豆酪蛋白培養基中28-32℃、160-200rpm培養12-18h得到培養物；

（2）將培養物轉接到大豆酪蛋白培養基中28-32℃、160-200rpm培養65-75h得到培養液；

（3）收集培養液5000-8000 rpm離心10-15min，丟棄上清液，使用含有質量濃度為0.05%吐溫-80的無菌磷酸鹽緩沖液重懸白色桿菌M6560細胞，得到白色桿菌M6560濃度為10⁸-10¹⁰CFU/mL的細胞懸浮液。

5.根據權利要求4所述的用于防治玉米莖基腐病的產品，其特征在于，所述白色桿菌M6560的細胞懸浮液制備方法為：

（1）將白色桿菌M6560大豆酪蛋白瓊脂培養基培養物接種于大豆酪蛋白培養基中30℃、180rpm培養12h得到培養物；

（2）將培養物轉接到大豆酪蛋白培養基中30℃、180rpm培養72h得到培養液；

（3）收集培養液6000 rpm離心10min，丟棄上清液，使用含有質量濃度為0.05%吐溫-80的無菌磷酸鹽緩沖液重懸白色桿菌M6560細胞，得到白色桿菌M6560的細胞懸浮液。

6.一種防治由串珠鐮刀菌引起的玉米莖基腐病的方法，其特征在于，包括以下兩個步驟：

（1）使用如權利要求1所述白色桿菌M6560的細胞懸浮液在玉米播種前拌種；

（2）使用如權利要求1所述白色桿菌M6560的細胞懸浮液在出苗4-5葉后莖基部及葉面噴霧。

7.根據權利要求6所述的防治由串珠鐮刀菌引起的玉米莖基腐病的方法，其特征在于，所述拌種具體為：使用白色桿菌M6560的細胞懸浮液稀釋至10⁷-10⁹CFU/mL，將待播種的玉米種子浸泡于稀釋后的細胞懸浮液中浸泡10-15 min，取出后瀝干至不再有懸浮液滴下為止，進行播種。

8.根據權利要求6所述的防治由串珠鐮刀菌引起的玉米莖基腐病的方法，其特征在于，所述出苗4-5葉后莖基部及葉面噴霧具體為：使用白色桿菌M6560的細胞懸浮液稀釋至10⁷-10⁹ CFU/mL，玉米4-5葉期整株噴霧，噴霧時要求液體全面浸濕玉米植株為止。