[發明專利]納米抗體及其應用

有效

• 申請號: 202011123929.5
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112225803B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 袁若森;宋月爽;陳曉旭;丁楠;原秀娟;湯鑫
• 申請（專利權）人: 長春百克生物科技股份公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/569
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張柳

本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及針對RSV病毒F蛋白的納米抗體、其編碼序列在診斷和治療中的應用。本發明提供的RSV納米抗體具有獨特的CDR1、2和3區序列，使所述抗體對RSV抗原具有特異的識別和結合能力。而與其他非特異性蛋白無交叉反應。通過中和活性檢測，其顯示了良好的中和活性，可單獨或與其他藥物或抗體等聯合應用，用于制備RSV治療性藥物。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及針對RSV病毒F蛋白的納米抗體、其編碼序列在診斷和治療中的應用。

背景技術

呼吸道合胞病毒 (respiratory syncytial virus， RSV)是導致嬰幼兒、老年人和免疫力低下的個體嚴重下呼吸道疾病的主要病因。 RSV 感染呼吸道黏膜上皮細胞，病毒蛋白能在胞內引起復雜的信號傳導，導致各種細胞因子表達異常，這可能是導致嚴重下呼吸道疾病的原因。相關滅活疫苗加重疾病的重要特征是誘導相關細胞因子大量分泌，從而引起不平衡的體液免疫和細胞免疫應答。

RSV屬副粘病毒科肺炎病毒屬，基因組為單股負鏈RNA，編碼11種蛋白質，其中3個為跨膜包膜糖蛋白F蛋白(fusion protein)、G蛋白(attachmentprotein)和SH蛋白(smallhydrophobic protein)，根據G蛋白抗原性的不同，將RSV分為A、B兩個亞型。F蛋白通過介導RSV與宿主細胞膜融合導致RSV核糖核蛋白穿入到細胞漿。感染后，表達在細胞膜上的F蛋白可促進感染細胞與鄰近細胞細胞膜融合形成合胞體。

F蛋白在RSV不同亞型間具有高度的抗原同源性，是主要的交叉保護性抗原，同時還是細胞毒性T淋巴細胞(CTL)的主要靶抗原，因此，F蛋白是機體免疫系統重要的靶抗原，可介導產生保護性抗體和細胞免疫反應，且能提供交叉保護作用。F是RSV最主要的表面結構蛋白之一，作為最重要的中和抗原，F蛋白具有大量的中和抗體識別表位。

單克隆抗體在一些應用方面仍存在缺陷：分子質量大(150kDa)限制其組織穿透能力；在體內能夠引起免疫反應，進而中和抗體活性；半衰期較長限制其在分子成像中的應用；生產操作復雜、生產成本高。

1993 年，科學家在駱駝體內發現天然缺失輕鏈的重鏈抗體(Heavy chainantibodies，HcAbs)，其抗原結合域可變區，也被稱為 VHH 或納米抗體(nanobody，Nb)，為抗體小型化研究提供了新的發展方向。隨后，軟體魚類體內也發現了駱駝體內類似的抗原受體(new antigen receptor，NAR) 。與其他小分子抗體相比，納米抗體具有如分子質量小(12～15kDa)、親和力高、免疫源性低、可溶性好、穩定性好、表達量高等獨特的性質，使其在疾病診斷及治療方面更具優勢。因此，提供針對于RSV病毒F蛋白的納米抗體、其編碼序列在診斷和治療中的應用具有重要的現實意義。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了針對RSV病毒F蛋白的納米抗體、其編碼序列在診斷和治療中的應用。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了抗呼吸道合包病毒（RSV）病毒F蛋白的納米抗體，所述納米抗體包括三個互補決定區CDR1、CDR2、CDR3；其中

（I）、所述納米抗體的互補決定區CDR1具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；和/或

所述納米抗體的互補決定區CDR2具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；和/或

所述納米抗體的互補決定區CDR3具有如SEQ ID No.3或4所示的氨基酸序列；

或（II）、如（I）所述氨基酸序列經取代、缺失或添加一個或多個氨基酸獲得的氨基酸序列，且與（I）所述氨基酸序列功能相同的氨基酸序列；

或（III）、與（I）或（II）所述氨基酸序列具有80%以上同一性的氨基酸序列。