[發(fā)明專利]基于雙抗體夾心均相化學(xué)發(fā)光法豬瘟病毒檢測(cè)試劑盒及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011122125.3
• 申請(qǐng)日: 2020-10-20
• 公開（公告）號(hào): CN112255399A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 查銀河;陳勇鋒;舒建洪;楊芳;黃磊;童夏霞;陳聰;周泉麗;林渝鈞;趙海波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江洪晟生物科技股份有限公司;浙江理工大學(xué);浙江理工大學(xué)紹興生物醫(yī)藥研究院有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 浙江納祺律師事務(wù)所 33257
• 代理人: 王士祥;鄭滿玉

1.一種基于雙抗體夾心均相化學(xué)發(fā)光法豬瘟病毒檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括試劑R1、試劑R2、試劑R3、陽性對(duì)照和陰性對(duì)照，其中：

所述試劑R1包括標(biāo)記鏈霉親和素的供體微球的緩沖液，所述供體微球能夠在680nm光下激發(fā)產(chǎn)生單體氧；

所述試劑R2包括標(biāo)記抗豬瘟病毒單克隆抗體的受體微球的緩沖液，所述受體微球能夠與單體氧反應(yīng)生成可檢測(cè)的615nm化學(xué)發(fā)光信號(hào)；

所述試劑R3為生物素化的抗豬瘟病毒單克隆抗體的緩沖液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中標(biāo)記抗豬瘟病毒單克隆抗體的受體微球?yàn)闃?biāo)記抗豬瘟病毒E2蛋白單克隆抗體的受體微球，所述緩沖液組分為0.01MPBS緩沖液、2％BSA、0.1％Proclin 300、5％蔗糖、0.1％Tween-20，其余為純化水，pH值為7.2。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑R3中生物素化的抗豬瘟病毒單克隆抗體為生物素化的抗豬瘟病毒E2蛋白的單克隆抗體，所述生物素化的抗豬瘟病毒E2蛋白的單克隆抗體的濃度為0.5μg/mL，所述緩沖液組分為0.01M PBS緩沖液、2％BSA、0.1％Proclin 300、5％蔗糖、0.1％Tween-20，其余為純化水，pH值為7.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的陽性對(duì)照為滅活的豬瘟病毒熒光PCR CT值在25±1之間的豬血清；所述陰性對(duì)照為滅活的豬瘟病毒熒光PCR無CT值的豬血清。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的供體微球和受體微球的直徑均為150nm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的試劑R1中供體微球的濃度為5μg/mL；所述的試劑R2中受體微球的濃度為2μg/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述試劑R1的緩沖液組分為0.01MPBS緩沖液、2％BSA、0.1％Proclin 300、0.1％Tween-20，其余為純化水，pH 7.2。