[發(fā)明專利]一種小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011121449.5
• 申請(qǐng)日: 2020-10-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112526006A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周丹丹;劉傲雪;沙禕煒;徐彤彤;吳清云;米卓爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鑒甄檢測(cè)技術(shù)（上海）有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、溶液配制：

對(duì)照品溶液配制：取柴胡皂苷C(SSc)、I(SSi)、H(SSh)、A(SSa)、B₂(SSb₂)、G(SSg)、B₁(SSb₁)對(duì)照品適量，精密稱定，分別置于容量瓶中，加入甲醇溶解，配制成所需濃度的對(duì)照品溶液，備用；

混合對(duì)照品溶液配制：精密量取所述7種對(duì)照品溶液，配制成所需質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液，備用；

供試品溶液配制：小柴胡顆粒適量，研細(xì)，精密稱定，加水使其完全溶解，經(jīng)活化好的C18固相萃取小柱，依次以含5％濃氨或1％NaOH的10％甲醇溶液、30％甲醇和分析純甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜寥萘科浚⒖诪V膜過(guò)濾，即得供試品溶液；

S2、高效液相色譜-電噴霧檢測(cè)器聯(lián)用進(jìn)行含量分析：

分別精密吸取經(jīng)步驟S1制得的所述混合對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算；采用電噴霧檢測(cè)器進(jìn)行色譜峰的檢測(cè)；

色譜條件：流動(dòng)相A：含0.01％乙酸或0.01％甲酸的水溶液、10％乙腈-90％水溶液(含0.1mmol乙酸銨，pH為4.0)；流動(dòng)相B：色譜純乙腈、90％乙腈-10％水溶液(含0.1mmol乙酸銨，pH為4.0)，進(jìn)行梯度洗脫；色譜柱Waters CORTECTS C18或色譜柱Thermo HypersilGOLD；柱溫：25-35℃；流速：0.7-0.9mL/min；

電噴霧檢測(cè)器條件：電噴霧檢測(cè)器，氮?dú)鈮毫Γ?5-50psi，量程：100pA，電噴霧溫度：50℃。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，S1中，所述C18固相萃取小柱先用甲醇6mL預(yù)洗，再用水10mL平衡。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，S2中，所述色譜柱Waters CORTECTS C18的柱長(zhǎng)為15cm，內(nèi)徑為4.6mm，填料粒徑為2.7μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，S2中，所述色譜柱Thermo Hypersil GOLD的柱長(zhǎng)為15cm，內(nèi)徑為4.6mm，填料粒徑為3μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述色譜柱Waters CORTECTS C18或色譜柱Thermo Hypersil GOLD采用十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，當(dāng)所述流動(dòng)相A采用含0.01％乙酸或0.01％甲酸的水溶液，所述流動(dòng)相B采用色譜純乙腈時(shí)，所述洗脫梯度為：

0～55min，30～32％B；

55～58min，32～90％B；

58～61min，90～30％B；

61～70min，30％B。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小柴胡顆粒中柴胡皂苷類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，當(dāng)所述流動(dòng)相A采用含0.1mmol乙酸銨(pH為4.0)的10％乙腈水溶液，所述流動(dòng)相B采用含0.1mmol乙酸銨(pH為4.0)的90％乙腈水溶液時(shí)，所述洗脫梯度為：

0～35min，25～35％B；

35～37min，35～90％B；

37～45min，90～25％B；

45～50min，25％B。