[發(fā)明專利]一種心肌肌鈣蛋白I檢測方法和試劑盒

在審

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• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN114034869A
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發(fā)明（設計）人: 劉春艷;汪榮
• 申請（專利權）人: 廣東菲鵬生物有限公司;菲鵬生物股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 周文波

1.一種心肌肌鈣蛋白I檢測試劑盒，其特征在于，其包括用于檢測心肌肌鈣蛋白I的第一抗體和第二抗體，其中，第一抗體結合心肌肌鈣蛋白I的第27-40位氨基酸片段；第二抗體結合心肌肌鈣蛋白CTNI-CTNC復合物。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，第一抗體為標記抗體時第二抗體為包被抗體；或第二抗體為標記抗體時第一抗體為包被抗體。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒進一步包括檢測心肌肌鈣蛋白I的第三抗體，所述第三抗體結合心肌肌鈣蛋白I的第83-93位氨基酸片段；

例如用于配對的抗體分為第一組抗體和第二組抗體，其中第一組抗體和第二組抗體選自下組：

1)第一組抗體包括第一抗體，并且第二組抗體包括第二抗體和第三抗體；

2)第一組抗體包括第二抗體，并且第二組抗體包括第一抗體和第三抗體；

3)第一組抗體包括第三抗體，并且第二組抗體包括第一抗體和第二抗體；

優(yōu)選地，第一組抗體為標記抗體，第二組抗體為包被抗體。

4.如權利要求1-3任一項所述的試劑盒，其特征在于，其中所述抗體的反應性為ELISA評價OD₄₀₅≥0.5。

5.如權利要求1-4任一項所述的試劑盒，其特征在于，其中所述標記抗體用可檢測標記物和/或結合配偶體標記，可檢測標記物例如金屬粒子，熒光標記，發(fā)色團標記，電子致密標記，化學發(fā)光標記，放射性標記，或酶標記；例如可以是羅丹明，熒光素，熒光微球，膠體金，吖啶酯，熒光素酶，辣根過氧化物酶，堿性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖-6-磷酸脫氫酶標記；結合配偶體例如是生物素/抗生物素蛋白，生物素/鏈霉抗生物素蛋白；例如標記抗體通過結合配偶體與可檢測標記物進行標記。

6.如權利要求1-5任一項所述的試劑盒，其特征在于，其中所述包被抗體連接至固相和/或結合配偶體，固相例如是磁性顆粒，膠乳粒子、微量滴定板、硝酸纖維素膜或微流控芯片；結合配偶體例如是生物素/抗生物素蛋白，生物素/鏈霉抗生物素蛋白；例如包被抗體通過結合配偶體與固相進行連接。

7.檢測心肌肌鈣蛋白I的抗體組合，其特征在于，包括第一抗體和第二抗體；任選地，還包括第三抗體；其中，第一抗體、第二抗體、第三抗體根據權利要求1-6中任一項所定義。

8.如權利要求7所述的抗體組合在制備檢測心肌肌鈣蛋白I的試劑盒中的用途。

9.如權利要求8所述的用途，其特征在于，其中所述試劑盒用于1)對心肌肌鈣蛋白含量進行動態(tài)檢測，例如用于進行實時監(jiān)測，和/或2)診斷早期急性心肌損傷，包括例如排除或預測早期急性心肌損傷。

10.一種制備權利要求7所述的抗體組合的方法，其特征在于，所述方法包括：

1)使用包含選自下述氨基酸片段1-2或蛋白質作為抗原或半抗原免疫動物：

片段1：心肌肌鈣蛋白I氨基酸片段27-40；

片段2：心肌肌鈣蛋白I氨基酸片段83-93；

蛋白質1：心肌肌鈣蛋白CTNI-CTNC復合物；和

2)從所述動物獲得分別結合所述片段1-2和蛋白質1的抗體。