[發明專利]一種測量抗氧化能力的方法

在審

• 申請號: 202011107996.8
• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN112255202A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發明（設計）人: 秦衛東;凌芮;高杰;孫敏;葛慶雨
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: G01N21/552
• 分類號: G01N21/552;G01N17/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種基于金納米棒的抗氧化能力測量方法，屬于納米材料技術領域。方法包括以下步驟：(A)采用種子生長法制備金納米棒溶液，將該溶液離心，去除水相，得到金納米棒；(B)將得到的金納米棒分散于三次蒸餾水中，離心，去除水相，得到純化金納米棒；(C)將得到的純化金納米棒分散于三次蒸餾水中，得到金納米棒工作溶液；(D)將400μL金納米棒工作溶液、50μL待測溶液及150μL刻蝕液混合后進行刻蝕反應；(E)將反應后的溶液離心，去除水相后溶解于10mM十六烷基三甲基溴化銨溶液中，重復上述步驟2次得到測量溶液；(F)測量。本發明提供的方法相比于現有的分光光度法具有準確、抗干擾能力強的優點。

技術領域

本發明涉及一種基于金納米棒的抗氧化能力測量方法，屬于納米材料技術領域。

背景技術

活性氧包括過氧化氫、超氧自由基、羥基自由基及其下游產物和過氧化物等。活性氧在體內的過度積累可導致細胞內蛋白質變異、質脂過氧化和DNA損傷等，被認為同人體內的諸多疾病發病機理密切相關，如：動脈粥樣硬化、糖尿病、慢性炎癥、神經系統紊亂以及多種癌癥。抗氧化劑對這些氧化誘導有害反應有抵御作用，可以保護重要的生物分子免受損傷，減少與衰老相關的慢性疾病的發生。

抗氧化能力測量包括體內法和體外法，體外法由于操作相對簡單成本低廉應用更為廣泛。體外測量方法包括電化學法、分光光度法、熒光法、化學發光法、色譜法以及毛細管電泳法等。其中，分光光度法是最常用的方法，分光光度法包括水溶性維生素E當量抗氧化能力檢測法(TEAC)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力檢測法、鐵離子(FRAP)還原抗氧化能力檢測法以及銅還原抗氧化能力法(CUPRAC，Talanta,2018,187,148-155)等。上述分光光度法中，如果從測量抗氧化劑的角度比較，CUPRAC是比較準確的方法，因為其對檸檬酸不發生響應。檸檬酸是食物和飲料中常見的成分，但是根據分類,檸檬酸不屬于抗氧化劑。而其它分光光度法在測量過程中都會對檸檬酸產生響應，因此，這些方法測得的抗氧化能力值理論上有偏差。

但是，CUPRAC本身也會產生偏差，主要來自于鐵離子的影響。鐵離子會與該方法中使用的2,9-二甲基-1,10-菲羅啉(DPA)發生反應而影響實驗結果。鐵元素是地球上豐度很高的元素，廣泛地存在于水體和土壤中，因此，食品和飲料中鐵離子濃度較高。另外，由于包括CUPRAC在內的分光光度法是采用在可見光區有吸收的自由基或中性分子作為探針，并根據探針分子與各類氧化劑或抗氧化劑作用后吸收光譜的變化來測量抗氧化能力，因此，分光光度法在測量有顏色的樣品時會受到干擾而產生誤差。

發明內容

本發明解決的技術問題在于提供一種適合于各種有色樣品的準確而穩定的測量抗氧化能力的方法。發明人實驗發現，將CUPRAC法的主要成分2,9-二甲基-1,10-菲羅啉和氯化銅以一定的比例混合，加入一定濃度的絡合劑硫氰化鉀(KSCN)以及十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)后可以實現對金納米棒的刻蝕。有鑒于此，本專利提供了一種基于金納米棒刻蝕的抗氧化能力測量方法，其特征在于，包括以下步驟：

(A)采用種子生長法制備金納米棒溶液，將該溶液離心，去除水相，得到金納米棒；

(B)將步驟(A)得到的金納米棒分散于三次蒸餾水中，離心，去除水相，重復上述步驟3次，得到純化金納米棒；

(C)將步驟(B)得到的純化金納米棒分散于三次蒸餾水中，得到金納米棒工作溶液；

(D)將400μL金納米棒工作溶液、50μL待測溶液及150μL刻蝕液混合后進行刻蝕反應；

(E)將步驟(D)得到的溶液離心，去除水相后溶解于10mM十六烷基三甲基溴化銨溶液中，重復上述步驟2次得到測量溶液；

(F)測量；

所述待測溶液是指樣品溶液或標準溶液；