[發(fā)明專利]一種田基黃提取物及其在制備抗新型冠狀病毒藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011106518.5
• 申請日: 2020-10-17
• 公開（公告）號: CN112263598A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇薇薇;楊子峰;鐘南山;馬欽海;李潤峰;李沛波;彭維;吳灝;師瑞;王永剛
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué);廣州呼吸健康研究院
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P31/14
• 代理公司: 廣東合拓律師事務(wù)所 44617
• 代理人: 黃開艷

本發(fā)明公開了一種田基黃提取物及其在制備抗新型冠狀病毒藥物中的應(yīng)用。該提取物由以下方法制備：田基黃藥材水提取液，上大孔樹脂柱，依次以水，20％乙醇和60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，濃縮回收乙醇后，即得。經(jīng)試驗(yàn)，結(jié)果表明：該田基黃提取物在18.75?75μg/mL濃度范圍，對新型冠狀病毒(SARS?COV?2)感染Vero E6細(xì)胞致細(xì)胞病變具有明顯抑制作用，明顯優(yōu)于白前苷B和槲皮素單體化合物。有望用于防治新型冠狀病毒(SARS?COV?2)感染。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種田基黃提取物及其藥物用途。

背景技術(shù)

2019新型冠狀病毒屬于β屬冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，常為多形性，直徑60-140nm。其基因特征與SARS-CoV和MERS-CoV有明顯區(qū)別。經(jīng)呼吸道飛沫和密切接觸傳播。感染并發(fā)病者以發(fā)熱、干咳和乏力為主要表現(xiàn)，少數(shù)患者伴有鼻塞、流涕、咽痛、肌痛和腹瀉等癥狀。重癥患者多在發(fā)病一周后出現(xiàn)呼吸困難和/或低氧血癥，嚴(yán)重者可快速進(jìn)展為急性呼吸窘迫綜合征、膿毒癥休克、難以糾正的代謝性酸中毒、凝血功能障礙及多器官功能衰竭等。自2019年底爆發(fā)疫情以來，導(dǎo)致全球死亡人數(shù)已超100萬。但針對該病毒目前尚未有特效藥物及疫苗，主要依靠自身免疫能力的提高。中醫(yī)藥在防治傳染性疾病中具有特色優(yōu)勢，挖掘抗新冠病毒的中藥成分，對抗擊新冠疫情具有重要作用。

田基黃又名地耳草，民間別名有小元寶草、雀舌草、七層塔等，為藤黃科金絲桃屬植物Hypericum japomicum Thumb的干燥全草。始載于清代何克諫撰寫的《生草藥性備要》，廣泛分布于長江流域及以南各地，原植物主產(chǎn)于廣東、廣西、四川、貴州以及江西等地。目前已從該植物中分離鑒定得到色原烯類、二肽類、雙苯吡酮類、間苯三酚類衍生物以及黃酮類等多種化學(xué)成分。現(xiàn)代藥理作用研究表明，田基黃具有抑菌、抗病毒、抗肝損傷、抗氧化以及抑制癌細(xì)胞等多種藥理功效。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種田基黃提取物，并公開其在制備抗新型冠狀病毒藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的田基黃提取物由以下方法制備：

田基黃藥材水提取液，上大孔樹脂柱，依次以水，20％乙醇和60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，濃縮回收乙醇后，即得。

洗脫方法優(yōu)選：上大孔樹脂柱，依次以8-12倍柱體積的水和20％乙醇洗脫，再以3-7倍柱體積的60％乙醇洗脫。最優(yōu)選：依次以10倍柱體積的水和20％乙醇洗脫，再以5倍柱體積的60％乙醇洗脫。

田基黃藥材水提取液的制備方法可為：田基黃藥材按料液比1:10，水煎煮提取2-3次，提取0.5-1小時(shí)，過濾即得。提取次數(shù)優(yōu)選3次，時(shí)間優(yōu)選0.5小時(shí)。

經(jīng)試驗(yàn)，結(jié)果表明：該田基黃提取物在18.75-75μg/mL濃度范圍，對新型冠狀病毒(SARS-COV-2)感染Vero E6細(xì)胞致細(xì)胞病變具有明顯抑制作用。有望用于防治新型冠狀病毒(SARS-COV-2)感染。

本發(fā)明的田基黃提取物主要含有槲皮苷、異槲皮苷、白前苷B、槲皮素等黃酮類成分，經(jīng)對單體化合物測定，白前苷B、槲皮素均具有一定的抗2019新型冠狀病毒作用，槲皮苷、異槲皮苷未檢測到抗該病毒作用。本提取物的作用與白前苷B、槲皮素單體化合物比較，作用明顯增強(qiáng)，提示其中的化合物槲皮苷、異槲皮苷雖然未檢測到抗病毒作用，但與白前苷B、槲皮素在一起，各化合物之間可能具有某些協(xié)同作用，提高了后二者的活性強(qiáng)度。

附圖說明

圖1是田基黃水提取液HPLC圖譜；

圖2是田基黃水提取液水洗脫部位的HPLC圖譜；

圖3是田基黃水提取液20％乙醇洗脫部位的HPLC圖譜；

圖4是田基黃水提取液60％乙醇洗脫部位的HPLC圖譜；

圖5是異槲皮苷HPLC圖譜；