[發明專利]一種基于活性巰基和報告離子的親電分子探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202011104872.4
• 申請日: 2020-10-15
• 公開（公告）號: CN112321489B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 柏川;高銀誼
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C07D211/34
• 分類號: C07D211/34;C09K11/06;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 趙崇楊

1.一種基于活性巰基和報告離子的親電分子探針，其特征在于，其結構式如式(I)所示：

2.權利要求1所述的基于活性巰基和報告離子的親電分子探針的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1.在反應容器中加入化合物A、化合物B和多肽縮合試劑在溶劑中進行縮合反應，反應結束后，分離純化得到白色固體中間體C，其化學反應方程式如下所示：

S2.在反應容器中加入溶劑和中間體C，再加入強堿溶液發生水解反應，反應完成后，加入鹽酸水溶液，之后將體系旋干，油泵干燥，重新加入溶劑攪拌，有白色固體析出，抽濾，濾液經兩次旋干，合并得白色固體中間體D，其化學反應方程式如下所示：

S3.在反應容器中加入中間體D、二硫代-4,4'-二氨基代二苯和多肽縮合試劑在溶劑中進行縮合反應，反應完成后，抽濾，濾餅用溶劑淋洗，濾液旋干，層析得紅色油狀中間體F，其化學反應方程式如下所示：

S4.在反應容器中加入溶劑、中間體F、二硫鍵還原劑和水，無氧條件下反應，反應完成后抽濾，濾液中分離純化得到白色固體probe，即為式(I)所示基于活性巰基和報告離子的親電分子探針，其化學反應方程式如下所示：

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S1所述化合物A、化合物B的摩爾比為1:1。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S1所述縮合反應為23～27℃反應2～3h。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S2所述中間體C和強堿的摩爾比為1:1.5～2。

6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S2、S3和/或S4所述反應為15～20℃反應過夜。

7.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S3所述中間體D和二硫代-4,4'-二氨基代二苯的摩爾比為1:0.5～1。

8.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟S4所述中間體F和二硫鍵還原劑的摩爾比為1:2。

9.權利要求1所述的基于活性巰基和報告離子的親電分子探針在檢測天然產物或者動植物細菌細胞，組織或器官提取物中活性親電分子中的非疾病診斷和治療用途的應用。

10.一種非疾病診斷和治療用途的檢測天然產物或者細胞中潛在的活性親電分子的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1.樣品前處理在反應容器中，加入天然產物或者細胞提取物，以及本發明式(I)探針化合物、抗壞血酸后，用超干無水甲醇/超干二氯甲烷/超干DMF做溶劑，反應溶劑需事先通入氬氣/氮氣除氧，惰性氣體保護，輕搖或者超聲使反應混合物全溶后，通入氬氣/氮氣除氧，立即旋緊蓋子，封上封口膜，常溫下攪拌2～40小時后，停止反應，立即旋干或者抽干反應液，用質譜級的甲醇制樣，配成0.1-100ppm的待測樣品溶液；

S2.對步驟S1的待測樣品溶液進行液相色譜-高分辨多級質譜檢測，進行色譜圖，質譜一級譜與質譜二級或多級質譜分析，以檢測，發現天然產物或者細胞中潛在的活性親電分子，并確定目標分子的精確分子量，質量差小于1-10ppm，同位素特征和可能的準確分子式；并明確目標化合物在相應液相色譜條件下的色譜性質、出峰時間。