[發明專利]一種甲氧基腎上腺素衍生物、免疫原、抗甲氧基腎上腺素特異性抗體及其制備方法與應用有效
| 申請號： | 202011102503.1 | 申請日： | 2020-10-15 |
| 公開（公告）號： | CN112266330B | 公開（公告）日： | 2023-02-24 |
| 發明（設計）人： | 張小可;王英;高慧;李冬 | 申請（專利權）人： | 長沙博源醫療科技有限公司 |
| 主分類號： | C07C229/14 | 分類號： | C07C229/14;C07C227/20;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/94;G01N33/539;G01N33/543 |
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| 地址： | 410000 湖南省長沙市瀏陽經濟技術*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 甲氧基 腎上腺素 衍生物 免疫原 抗甲氧基 特異性 抗體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種應用抗甲氧基腎上腺素特異性抗體制備的甲氧基腎上腺素檢測試劑，其特征在于，所述甲氧基腎上腺素檢測試劑其為甲氧基腎上腺素均相酶免疫檢測試劑或甲氧基腎上腺素膠乳增強免疫比濁檢測試劑；
所述甲氧基腎上腺素均相酶免疫檢測試劑，由R1試劑與R2試劑組成，所述R1試劑包含所述的抗甲氧基腎上腺素特異性抗體與R1緩沖液，所述R2試劑包含甲氧基腎上腺素葡萄糖-6-磷酸脫氫酶標記偶聯物與R2緩沖液；
所述的R1緩沖液含有酶底物、輔酶、牛血清白蛋白及Tris緩沖液，所述的酶底物為葡萄糖-6-磷酸，所述的輔酶為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；
所述的甲氧基腎上腺素葡萄糖-6-磷酸脫氫酶標記偶聯物由甲氧基腎上腺素衍生物與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶偶聯而成；其結構式如式Ⅲ所示：
所述的R2緩沖液為含有牛血清白蛋白的Tris緩沖液；
所述甲氧基腎上腺素膠乳增強免疫比濁檢測試劑，由L1試劑與L2試劑組成；
所述L1試劑由所述的抗甲氧基腎上腺素特異性抗體、pH＝8.0的緩沖液、牛血清白蛋白、氯化鈉、吐溫-20、丙三醇、乙二胺四乙酸、促凝劑以及防腐劑組成；
所述L2試劑由甲氧基腎上腺素-牛血清白蛋白復合體包被的聚苯乙烯膠乳顆粒、pH＝8.0的緩沖液、牛血清白蛋白、氯化鈉、吐溫-20、丙三醇、乙二胺四乙酸以及防腐劑組成；
所述的甲氧基腎上腺素-牛血清白蛋白復合體由甲氧基腎上腺素衍生物與牛血清白蛋白偶聯而成，其結構式如式Ⅳ所示：
所述的聚苯乙烯膠乳顆粒直徑范圍為50-250nm；
所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液、甘氨酸緩沖液、MES緩沖液、硼酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液或巴比妥緩沖液中的一種；
所述促凝劑為PEG-4000、PEG-6000、PEG-8000或硫酸葡聚糖鈉中的一種；
所述防腐劑為疊氮鈉、硫柳汞、苯酚或乙基汞硫代硫酸鈉中的一種；
所述抗甲氧基腎上腺素特異性抗體為使用甲氧基腎上腺素免疫原對實驗動物進行注射后所得到的特異性抗體，所述的實驗動物為兔子、山羊、綿羊、小鼠、大鼠、豚鼠或馬中的一種；
所述甲氧基腎上腺素免疫原由甲氧基腎上腺素衍生物與載體蛋白連接而成，其結構式如式Ⅱ所示：
其中，載體蛋白為重組牛血清白蛋白，所述重組牛血清白蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示；
所述的甲氧基腎上腺素衍生物，其結構式如式Ⅰ所示：
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