[發(fā)明專利]利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011102149.2
• 申請日: 2020-10-15
• 公開（公告）號: CN112159486B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張朝陽;喬康康;崔潔;高秀強(qiáng);馮朝;王志華;高飛
• 申請（專利權(quán)）人: 河北常山凱庫得生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 北京中睿智恒知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 16025
• 代理人: 鄧大為

本發(fā)明提供了一種利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法，包括低鹽復(fù)合酶解得到酶解液、酶解液濃縮得到濃縮液、離子交換得到粗品肝素鈉洗脫液和醇淀烘干得到粗品肝素鈉：其中低鹽復(fù)合酶解中，添加飽和腸衣鹽水，調(diào)節(jié)所述粘膜溶液的鹽濃度至質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8~1.0%。本發(fā)明的利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法，可以在低鹽條件下實(shí)現(xiàn)粗品肝素鈉的酶解和吸附過程，可在保障粗品肝素鈉收率的同時，使排放的廢水中鹽濃度降低，減少廢水處理成本，減少環(huán)境污染，增加綜合經(jīng)濟(jì)收益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及動物腸衣的粗品肝素鈉提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法。

背景技術(shù)

肝素是一種廣泛存在于哺乳動物組織中的黏多糖，主要存在于肥大細(xì)胞中，具有抗凝血作用，被廣泛用于手術(shù)和腦血栓、心肌梗死等的治療。肝素的分子量大約?3000—37500，對商品肝素的研究提示至少有?21?種分子個體。肝素鈉是肝素的鈉鹽，是臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)嵱米顝V泛的抗凝血藥物，它是由D-葡萄糖胺、N-乙酰葡萄糖胺、D-葡糖醛酸以及L-艾杜糖醛酸交替組成的粘多糖硫酸酯，被廣泛用于預(yù)防和治療腦血栓。肝素鈉多與蛋白質(zhì)結(jié)合以蛋白質(zhì)-肝素復(fù)合物存在，主要在小腸粘膜和肺臟中含量最高。肝素鈉主要用于抗凝血作用，是目前最重要的抗凝血和抗血栓的生化藥物之一。肝素鈉粗品是我國的傳統(tǒng)出口產(chǎn)品，在國際上占有重要的地位。

目前，肝素鈉不能人工合成，只能從動物組織中提取。肝素鈉主要是從豬、羊小腸黏膜和牛肺、鹽漬腸衣鹽水等中提取。其中，豬小腸粘膜是當(dāng)前提取肝素鈉最主要的原料。粗品肝素鈉生產(chǎn)原料為豬小腸，豬小腸經(jīng)刮腸機(jī)加工，將腸衣和腸粘膜分離，腸衣經(jīng)過飽和鹽水鹽漬，殺菌保鮮，泡腸衣的飽和鹽水中則含有肝素成分。粗品肝素鈉是從豬小腸粘膜中提取的肝素的鈉鹽，是精品肝素鈉的原料。肝素鈉的粗品中由于含有的雜質(zhì)較多、樣品不純，不能直接作為臨床藥品應(yīng)用。粗品肝素鈉的質(zhì)量在一定程度上決定了精品肝素鈉的質(zhì)量，因此粗品肝素鈉的制備至關(guān)重要。

粗品肝素目前常用的生產(chǎn)方式主要有高鹽鹽解法、酶解鹽解復(fù)合法和酶解法。由于腸衣鹽漬過程會產(chǎn)生大量的飽和腸衣鹽水，高濃度鹽水的處理非常困難，因此，企業(yè)通常會采用高鹽鹽解法和酶解鹽解復(fù)合法，并在反應(yīng)過程中添加泡腸衣鹽水，達(dá)到內(nèi)部自然消耗，隨生產(chǎn)廢水外排。然而，行業(yè)內(nèi)生產(chǎn)廢水鹽濃度普遍在3%及以上，廢水處理難度大、成本高。

如CN105218705A涉及一種利用雙酶解法制備肝素鈉的方法。該利用雙酶解法制備肝素鈉的方法包括以下步驟?：采用雙酶解方法將肝素鈉?-?蛋白復(fù)合體中的肝素鈉進(jìn)行解離，然后通過升溫、樹脂吸附、洗脫、醇沉、烘干等步驟將肝素鈉完全提取出來，提高肝素鈉收率。采用雙酶解可以適當(dāng)降低鹽濃度，減輕污染，降低蒸汽用量和降溫水用量。大生產(chǎn)可以采用豬胰臟活化后使用，每?6?噸反應(yīng)液豬胰臟成本?100?元左右。豬胰臟成本和蒸汽成本可以抵消。該專利申請中鹽濃度為?3.0-4.0%。

又如CN108456262A提供了一種高純度肝素鈉的制備工藝，主要包括3?.0％(w/v)的氯化鈉鹽解、0?.1％～0?.2％(?w/v?)的胰蛋白酶酶解、過氧化氫-臭氧高效氧化、無水乙醇沉淀、丙酮脫水和真空干燥等步驟，其中過氧化氫-臭氧高效氧化體系會生成HO2-,是自由基OH?產(chǎn)生的誘發(fā)劑，自由基OH?一旦產(chǎn)生，就會引發(fā)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，加快氧化速度，提高氧化效果。采用本方案所述的工藝提純肝素鈉與傳統(tǒng)的多級過氧化氫氧化處理比起來，節(jié)約了至少40％的時間，效價提高了9U/mg，效價回收率提高了8％，制得的肝素鈉純度高，色澤好。

隨著國內(nèi)環(huán)保形勢越來越嚴(yán)峻，許多中小企業(yè)由于高鹽廢水污染嚴(yán)重逐漸被淘汰。因此，開發(fā)一種低鹽甚至無鹽的粗品肝素鈉制備方法，成為領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明旨在提出一種利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法，以在保證粗品肝素鈉品質(zhì)的前提下，解決高鹽廢水污染的問題。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種利用豬小腸粘膜低鹽制備粗品肝素鈉的方法，包括下列步驟