[發(fā)明專利]牙鲆非編碼小RNA(miRNA)及其的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011101384.8
• 申請(qǐng)日: 2020-10-15
• 公開（公告）號(hào): CN112280778B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫黎;孫驗(yàn)玲;管曉璐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;A61K31/7105;A61P31/20
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體的說(shuō)是牙鲆pol?miR?150拮抗劑在抑制病毒感染中的應(yīng)用。本發(fā)明的pol?miR?150拮抗劑注射牙鲆后能夠顯著抑制腫大細(xì)胞病毒(megalocytivirus)的復(fù)制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體的說(shuō)是牙鲆非編碼小RNA(miRNA(pol-miR-150))及其在抑制病毒感染中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

MiRNA(microRNA)是一種非編碼小RNA，通過(guò)與靶基因mRNA序列互補(bǔ)而調(diào)控基因表達(dá)。在大多數(shù)情況下，miRNA誘導(dǎo)靶mRNA降解或在翻譯后水平阻止蛋白質(zhì)合成，但有些情況下，miRNA也能激活mRNA轉(zhuǎn)錄或蛋白質(zhì)翻譯。越來(lái)越多的研究表明，miRNA參與多種生物學(xué)活動(dòng)，包括生長(zhǎng)、發(fā)育、細(xì)胞凋亡、能量代謝、免疫以及病原感染等。盡管越來(lái)越多miRNAs的功能被揭示，絕大部分miRNAs的功能仍不清楚。牙鲆(Paralichthys olivaceus)是一種海水魚類，在我國(guó)及亞洲其它國(guó)家屬于重要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。在牙鲆養(yǎng)殖過(guò)程中，病毒感染和流行是危害牙鲆健康養(yǎng)殖的主要因素之一。目前，虹彩病毒科的病毒是影響牙鲆養(yǎng)殖業(yè)的主要病毒之一。虹彩病毒科包括幾種不同類型的病毒，其中一種為腫大細(xì)胞病毒(megalocytivirus)。腫大細(xì)胞病毒是一種危害嚴(yán)重的魚類病毒，能感染多種魚類。目前，直接應(yīng)用于抗魚類病毒的相關(guān)制劑研究很少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種牙鲆非編碼小RNA(miRNA(pol-miR-150))在抑制病毒感染中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

牙鲆非編碼小RNA(pol-miR-150)為SEQ ID NO:1所示的堿基序列所示。所述牙鲆pol-miR-150在制備抑制病毒感染的制劑中的應(yīng)用。

所述牙鲆pol-miR-150在制備拮抗劑，抑制病毒感染中的應(yīng)用。

所述病毒為腫大細(xì)胞病毒(megalocytivirus)。

本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明所涉及的pol-miR-150拮抗劑作為免疫調(diào)節(jié)分子，能夠有效提升牙鲆對(duì)腫大細(xì)胞病毒的抗性。本發(fā)明的pol-miR-150拮抗劑注射牙鲆后能夠顯著抑制腫大細(xì)胞病毒的感染。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的pol-miR-150拮抗劑抑制腫大細(xì)胞病毒感染脾臟的結(jié)果圖(*P0.05)，牙鲆在pol-miR-150拮抗劑存在條件下(A)或在pol-miR-150拮抗劑陰性對(duì)照NC存在條件下(B)感染腫大細(xì)胞病毒，或者在無(wú)pol-miR-150拮抗劑或NC條件下(C)感染腫大細(xì)胞病毒，4天后檢測(cè)脾臟中病毒量。數(shù)值是三次實(shí)驗(yàn)的平均值，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示.*P0.05。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例旨在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行舉例描述，而非以任何形式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。

實(shí)施例1

牙鲆非編碼小RNA——pol-miR-150的獲得：

Pol-miR-150是牙鲆體內(nèi)表達(dá)的一種非編碼小RNA，利用高通量測(cè)序獲得其序列，如下：

SEQ ID NO:1：5’-CACUGGUACAAGGAUUGGGAGU-3’

實(shí)施例2

pol-miR-150作為拮抗劑抗腫大細(xì)胞病毒實(shí)驗(yàn)：

步驟1)pol-miR-150液和pol-miR-150NC(陰性對(duì)照)液的制備：