[發明專利]一種體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法

在審

• 申請號: 202011093305.3
• 申請日: 2020-10-13
• 公開（公告）號: CN112176021A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 陳益瑩
• 申請（專利權）人: 普羅布諾（重慶）生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 重慶信航知識產權代理有限公司 50218
• 代理人: 穆祥維

本發明公開了一種體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法，該方法包括如下步驟：1)腸癌類器官的構建，使用結腸癌、直腸癌或結直腸癌患者通過手術或活檢得到的癌組織培養成更純凈的腸癌類器官；2)大通量藥物篩選試驗，以微器官為單位進行高通量藥物敏感性檢測。本發明的體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法具有：研磨組織使消化時間縮短，且消化程度一致；溫和的消化液減少此步驟對細胞的傷害；不同的孔徑過濾，更精確篩選所需細胞；去除免疫細胞，獲得更純凈的癌細胞；自制培養基，更符合腸癌類器官生長所需成分，提高培養成功率；以類器官為單位進行藥篩，更好的模擬臨床用藥后體內癌組織的反應。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及一種體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法。

背景技術

目前，預測癌癥患者用藥的方法主要有以下幾種：

1)基因診斷

臨床上出現基因診斷后所用靶向藥無效的情況較多，可能由于體內環境復雜，基因突變不是主要致病因素或其他未知原因，所以基因診斷對患者用藥的預測性不高。

2)癌癥細胞系用藥實驗

細胞系體外生長環境與體內環境有顯著不同，且多為商業化的通用細胞系，個性化程度低，無法準確模擬實際腫瘤對藥物的反應，也無法做到個性化，預測性不高。

3)臨床人體用藥療效統計分析

臨床用藥時間周期通常以年為單位，短時間內無法得知所用藥物是否對患者有效。

4)類器官技術

目前類器官培養技術仍在不斷探索中，培養出生長狀態良好且功能接近原病灶的癌癥類器官仍是該領域研究者努力的方向。

發明內容

針對現有技術中存在的上述不足，本發明提供了一種體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法，該方法完善腸癌類器官的培養方法，更精確的模擬癌癥器官體內生長狀態，使其對藥物的敏感性更接近體內癌癥細胞對藥物的敏感性，更高效和直觀的反映有效藥物，同時該方法根據患者個體差異獲得個性化的有效藥物。

為了解決上述技術問題，本發明采用了如下技術方案：

一種體外構建的精準預測癌癥患者用藥的方法，該方法包括如下步驟：

1)腸癌類器官的構建

使用結腸癌、直腸癌或結直腸癌患者通過手術或活檢得到的癌組織培養成更純凈的腸癌類器官；該步驟包括了如下步驟：

a)對癌組織需要進行研磨操作；

b)對癌組織的消化使用PBS和Tryple處理28-32min；

c)對消化液進行不同孔徑的過濾；

d)對消化液進行去除免疫細胞及紅細胞的操作；

e)使用自制培養基進行培養；

2)大通量藥物篩選試驗；

以微器官為單位進行高通量藥物敏感性檢測。

藥篩結果可個性化指導提供該癌癥組織的患者用藥。

作為本發明的一種優選方案，步驟1)中的腸癌類器官的構建具體包括如下步驟：

1.1)清洗：將組織取出放入普通培養皿中用PBS清洗3-4次，至無血性混濁，液體基本無色；

1.2)研磨：洗凈后將組織轉移至干凈的低吸附皿中使用無菌刀片剁碎，使其均勻松散且不粘連；

1.3)消化：取4ml組織消化液(PBS+Tryple)消化剁碎的組織，吹打混勻，并在37℃恒溫水浴鍋中，消化30min；