[發明專利]DRN蛋白質及相關生物材料與其在提高植物體細胞再生效率上的應用

有效

• 申請號: 202011088884.2
• 申請日: 2020-10-13
• 公開（公告）號: CN112159465B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 焦雨鈴;徐夢雪
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 莫舒穎

本發明公開了一種與植物體細胞再生效率相關的DRN蛋白質及其相關生物材料與應用。所述DRN蛋白質具體可為如下A1)、A2)或A3)的蛋白質：A1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白質；A2)將A1)的蛋白質經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與A1)所示的蛋白質具有90％以上的同一性且具有提高植物體細胞再生效率活性的蛋白質；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端連接蛋白質標簽得到的融合蛋白質。DRN蛋白質及其相關生物材料可用于提高植物體細胞再生效率。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中DRN蛋白質及相關生物材料與其在提高植物體細胞再生效率上的應用。

背景技術

植物體細胞具有在適當條件下再生發育成為完整植物體的能力。這種再生能力不僅是植物修復損傷組織，產生新器官的基礎，而且被廣泛應用于組織培養等農業生產實踐中。

已經證實，利用植物體細胞原生質體轉化再生獲得轉基因植物，具有容易獲得大量受體細胞，轉化高效且穩定等優點，可以極大提升水稻、小麥、玉米等農作物的遺傳轉化效率。然而，由于轉化過程和后續抗性篩選會對細胞發育造成脅迫，轉化后的原生質體只有部分可以獲得再生能力，所以提高植物體細胞再生效率對提升作物遺傳轉化效率尤為重要。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何提高植物體細胞再生效率。

本發明提供了一種蛋白質，名稱為DRN，是如下A1)、A2)或A3)的蛋白質：

A1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白質；

A2)將A1)的蛋白質經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與A1)所示的蛋白質具有90％以上的同一性且具有提高植物體細胞再生效率活性的蛋白質；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端連接蛋白質標簽得到的融合蛋白質。

上述蛋白質可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進行生物表達得到。

上述蛋白質中，所述蛋白質標簽(protein-tag)是指利用DNA體外重組技術，與目的蛋白質一起融合表達的一種多肽或者蛋白質，以便于目的蛋白質的表達、檢測、示蹤和/或純化。所述蛋白質標簽可為Flag標簽、His標簽、MBP標簽、HA標簽、myc標簽、GST標簽和/或SUMO標簽等。

上述蛋白質中，同一性是指氨基酸序列的同一性?？墒褂脟H互聯網上的同源性檢索站點測定氨基酸序列的同一性，如NCBI主頁網站的BLAST網頁。例如，可在高級BLAST2.1中，通過使用blastp作為程序，將Expect值設置為10，將所有Filter設置為OFF，使用BLOSUM62作為Matrix，將Gap existence cost，Perresidue gap cost和Lambda ratio分別設置為11，1和0.85(缺省值)并進行檢索一對氨基酸序列的同一性進行計算，然后即可獲得同一性的值(％)。

上述蛋白質中所述90％以上的同一性可為至少91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

與DRN相關的生物材料也屬于本發明的保護范圍。

本發明所提供的與蛋白質DRN相關的生物材料，為下述B1)至B5)中的任一種：

B1)編碼DRN的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表達盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重組載體、或含有B1)所述表達盒的重組載體；

B4)含有B1)所述核酸分子的重組微生物、或含有B2)所述表達盒的重組微生物、或含有B3)所述重組載體的重組微生物；