[發(fā)明專利]一種2,4,5-三氯苯氧乙酸半抗原、人工抗原及其在免疫檢測中的應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011088212.1
• 申請日: 2020-10-13
• 公開（公告）號: CN112174838A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設計）人: 李斌;江林峰;蘇振賢;石松
• 申請（專利權）人: 廣東達元綠洲食品安全科技股份有限公司;廣東達元食品藥品安全技術有限公司;廣州達元食品安全技術有限公司;廣東中檢達元檢測技術有限公司
• 主分類號: C07C217/84
• 分類號: C07C217/84;C07C213/02;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/577
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 譚英強

本發(fā)明公開了一種2,4,5?三氯苯氧乙酸半抗原、人工抗原及其在免疫檢測中的應用。本發(fā)明設計的2,4,5?三氯苯氧乙酸半抗原(2?(2?胺基?3，4，6?三氯苯氧基)乙酸)引入的手臂不僅具有活性基團，還可以完整保留待測目標物的羧基基團，使得半抗原與待測目標物的電子云密度保持一致，偶聯(lián)簡單。基于此構建的2,4,5?三氯苯氧乙酸人工抗原及單克隆抗體用于ELISA檢測特異性強，IC50值為4.9μg/L；用于熒光定量免疫層析技術時，靈敏度為3μg/L，且具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。

技術領域

本發(fā)明涉及屬于免疫檢測領域，具體涉及一種2,4,5-三氯苯氧乙酸半抗原、人工抗原及其在免疫檢測中的應用

背景技術

2,4,5-三氯苯氧乙酸(6-benzylarninopuring，2,4,5-三氯苯氧乙酸)是第一個人工合成的細胞分裂素，為白色或類白色晶體，難溶于水，微溶于乙醇，在酸、堿中穩(wěn)定，具有抑制植物葉內葉綠素、核酸、蛋白質的分解，保綠防老；將氨基酸、生長素、無機鹽等向處理部位調運等多種效能，廣泛用在農業(yè)、果樹和園藝作物從發(fā)芽到收獲的各個階段。由于2,4,5-三氯苯氧乙酸藥效良好、價格低廉，被當成一種生長調節(jié)劑廣泛應用于無根培植豆芽的種植中。如果人體攝入過多2,4,5-三氯苯氧乙酸，會刺激皮膚黏膜，造成食道、胃黏膜損傷，出現(xiàn)惡心、嘔吐等病癥。原國家食品藥品監(jiān)督管理總局、農業(yè)部、國家衛(wèi)生和計劃生育委員會曾聯(lián)合發(fā)布公告(2015年第11號)禁止2,4,5-三氯苯氧乙酸等物質在豆芽生產過程中的使用，因此，加強對2,4,5-三氯苯氧乙酸殘留量監(jiān)測對于保證食品質量安全十分重要。

有研究曾對2,4,5-三氯苯氧乙酸化學除草劑是否會誘發(fā)人體外周血淋巴細胞進行實驗觀察，在實驗中發(fā)現(xiàn)，在不加2,4,5-三氯苯氧乙酸化學除草劑時，正常人淋巴細胞的SCE值也有一定的變化范圍，當化學除草劑濃度加至20皮克時，即有強烈的誘變效應，濃度提高到80皮克時，它的誘變作用更加強烈，說明誘變效應與添加化學除草劑的濃度相關。

目前用于檢測2,4,5-三氯苯氧乙酸的方法主要有傳統(tǒng)的檢測方法，如分光光度法、高效液相色譜法及其聯(lián)用技術等，這些方法雖然可以精確定量，但由于設備儀器昂貴，檢測時間長，且需專業(yè)人員操作，因此無法實現(xiàn)真正意義上的現(xiàn)場快速檢測；另一種檢測方法為免疫學檢測技術，此方法具有高特異性和高選擇性的特點，非常適用于復雜基質痕量組分的分離或檢測，隨著學科間的相互滲透，其檢測方法層出不窮，應用范圍亦日益擴大，與傳統(tǒng)檢測方法相比，免疫學檢測技術具有經濟、快速、技術要點低、操作簡便等特點。但免疫分析檢測技術的關鍵是抗原和抗體的性能決定的，而抗原和抗體的關鍵又是其相應藥物的半抗原。

因此需設計出具有更高識別度的半抗原、相對應的人工抗原成為亟需解決的問題。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種2,4,5-三氯苯氧乙酸半抗原；

本發(fā)明的另一目的在于提供上述的半抗原的制備方法；

本發(fā)明的另一目的在于提供一種人工抗原；

本發(fā)明的另一目的在于提供上述的人工抗原的制備方法；

本發(fā)明的另一目的在于提供上述人工抗原在制備2,4,5-三氯苯氧乙酸單克隆抗體中的應用；

本發(fā)明的另一目的在于提供上述人工抗原在ELISA檢測中的應用。

本發(fā)明所采取的技術方案是：

本發(fā)明的第一個方面，提供：

一種2,4,5-三氯苯氧乙酸半抗原，該半抗原具有式I所示的結構：

相較于現(xiàn)有的2,4,5-三氯苯氧乙酸半抗原，利用本發(fā)明中的半抗原制備得到的人工抗原能夠保有羧基特征基團，從而不影響該人工抗原與待測目標物的電子云密度和結構化學性質一致性，使該人工抗原具有優(yōu)異的特異性和準確性。