[發(fā)明專利]一種區(qū)分荔枝品種的SSR引物組及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011085923.3
• 申請日: 2020-10-12
• 公開（公告）號: CN112176088B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐振江;方超;劉洪;饒得花;江院;陳孟強;唐軒;黃展權(quán);馬強;邱友媚
• 申請（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12Q1/6806;C12N15/11
• 代理公司: 廣州專理知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 44493
• 代理人: 張鳳

1.一種SSR引物組用于區(qū)分荔枝品種的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)提取荔枝品種的DNA；

2)以步驟1)提取的DNA為模板，選取表型差異最大的6種荔枝品種，選取多態(tài)性最豐富的且?guī)颓逦囊铮Y選出6組引物對；

3)利用6組SSR引物對荔枝品種進行PCR擴增以及毛細管電泳，進行樹狀分析判定，品種間差異位點數(shù)大于4為不同品種，品種間差異位點數(shù)≤4為近似品種或者相同品種；

其中，所述6組荔枝SSR引物對中的正向引物和反向引物的核苷酸序列分別如序列表中SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.12所示；

所述步驟1)所述提取荔枝品種的DNA的方法包括：

a)預熱CTAB抽提液和β-巰基乙醇的混合物；

b)取荔枝的嫩綠葉片，置于預冷過的研缽中，加入PVP進行快速研磨得粉末；

c)將研磨得到的粉末加入到步驟a)的混合物中，混勻，吸取上清液，加入等體積的氯仿和異戊醇的混合物，離心；

d)吸取步驟c)離心后的上清液加入苯酚、氯仿和異戊醇的混合物，離心；

e)吸取步驟d)離心后的上清液加入醋酸鈉和無水乙醇，離心，收集沉淀；

f)洗滌沉淀，溶解，離心，獲取沉淀，備用。

2.如權(quán)利要求1所述的一種SSR引物組用于區(qū)分荔枝品種的方法，其特征在于，應用所述SSR引物組應用于品種區(qū)分鑒定以及DNA指紋圖譜構(gòu)建。

3.如權(quán)利要求1所述的一種SSR引物組用于區(qū)分荔枝品種的方法，其特征在于，應用所述SSR引物組應用于包括荔枝遺傳多樣性分析。