[發明專利]一種乳化劑對蛋鴨生產性能和脂肪代謝影響的應用方法

在審

• 申請號: 202011081280.5
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112219790A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 盧立志;李浙烽;李國勤;鄭強強;侯嘉;黃曼曼;田勇;曾濤;陳黎;許文武;徐二華;王淼;沈軍達;陶爭榮;徐堅
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 程華

1.一種乳化劑對蛋鴨生產性能和脂肪代謝影響的應用方法，其特征在于，

步驟1、試驗設計

采用單因素完全隨機試驗設計，選取300日齡、體重相近、飼養管理水平一致的進入產蛋高峰期的蛋鴨480只，隨機分為4組，每組6個重復，每個重復20只蛋鴨，各組蛋鴨平均產蛋率為80％；以玉米-豆粕為基礎日糧，配制設計4組試驗日糧，飼養試驗預試期為30d，正式試驗期為56d，其中，對照組包括樣品數120只，采用基礎日糧；試驗I組包括樣品數120只，采用基礎日糧+100g/t乳化劑；試驗II組包括樣品數120只，采用基礎日糧+150g/t乳化劑；試驗III組包括樣品數120只，采用基礎日糧+200g/t乳化劑；

步驟2、飼養管理

采用密閉式鴨舍，縱向負壓通風，人工光照強度為15-20lux，每天恒定光照為10h；對照組和試驗組采用相同基礎日糧，人工飼喂，自由飲水，每天8：00撿蛋，同時進行喂料，下午2：30開始勻料，并稱取第二天所需飼料；按常規飼養管理進行消毒、防疫的工作；

步驟3、測定指標與方法

3.1)生產性能指標

從正式飼養試驗每天8：00定時收蛋，分別記錄各組各個重復產蛋枚數、蛋重以及畸形蛋、破損蛋個數，每周稱量一次剩料的重量，為第二周的第一天稱量上一周的剩料；

(1)產蛋率＝各組所產蛋個數/各組鴨數×100％

(2)枚蛋重＝各組總蛋重/枚數×100％

(3)料蛋比＝各組試驗期耗料量/各組試驗期產蛋量

3.2)蛋品質測定

在正式飼養試驗的前一天和試驗結束當天，每重復選取3枚蛋，進行蛋品質測定，試驗階段每天記錄每組每個重復產蛋數和蛋重；

用蛋品質測定儀測定蛋殼強度、蛋白高度、哈氏單位；

蛋重、蛋殼重、蛋黃重均采用電子天平稱量，單位為g；

哈氏單位：HU＝100*lg[h+7.57-1.7*(w^0.37)]，其中：h為測量蛋品攤在平臺上的蛋白高度，w為測量蛋品整蛋的質量；

3.3)血清生化指標

在試驗開始前和試驗結束后，以重復為單位，每重復抽取1只進行翅靜脈采血，每只鴨需至少收集2ml，采集后放入離心機并用3000r/s轉速下離心15min，取上清液；采用酶法測定血清中TG、TC含量；采用氧化酶法測定LDL、VLDL、HDL含量；以上用于測定的試劑盒均于北京華英生物技術研究所購買，且測定方法均嚴格按照試劑盒說明書來進行；

3.4)盲腸內容物提取

試驗結束后，每重復隨機抽取2只鴨進行頸部放血宰殺，迅速收集盲腸內容物；

3.5)盲腸內容物16S測序

該測序過程交由上海派森諾生物科技股份有限公司完成；提取總DNA，同時采用Nanodrop對DNA進行定量，并通過1.2％瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA提取質量；設計引物后對特定基因片段進行PCR擴增；之后利用磁珠純化方法對擴增產物進行回收；然后將PCR擴增回收產物進行熒光定量，熒光試劑為Quant-iTPicoGreen dsDNA Assay Kit，定量儀器為Microplate reader，BioTek，FLx800；最后采用Illumina公司的TruSeq Nano DNA LTLibrary Prep Kit制備測序文庫并上機進行高通量測序；

分析時按照QIIME2 DADA2分析流程進行序列去噪或OTU聚類，再對各樣本分析在不同物種分類學水平的具體組成，了解整體概況，然后評估每個樣本的Alpha多樣性水平，并在ASV/OTU層面，計算各樣本的距離矩陣，并通過多種非監督的排序、聚類手段，結合相應統計學檢驗方法，衡量不同組間的Beta多樣性差異及差異顯著性；

3.6)數據處理

試驗數據用Excel進行統計；用IBM SPSS Statistics 25進行單因素方差分析，方差分析時采用LSD和Duncun進行組間差異性檢驗，組間差異顯著時，P＜0.05，組間差異不顯著時，P＞0.05；用GraphPad Prism 6.01進行制圖。