[發明專利]基于COX10基因插入缺失多態性位點的心源性猝死易感性檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011079845.6
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112159841B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 何艷;楊真真;于歡;高玉振
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

本發明公開了一種基于COX10基因插入缺失多態性位點的心源性猝死易感性檢測試劑盒。本發明的試劑盒中包含的特異性引物對是針對COX10基因上的rs397763766號插入缺失位點而設計，能特異性擴增出包含該位點的DNA片段并通過檢測不同長度片段在毛細管電泳中的遷移率來識別不同基因型，結合病例對照研究發現，可認為被檢測DNA的COX10基因上的rs397763766號插入缺失位點攜帶有缺失型等位基因者為SCD易感型。因此，該技術通過檢測個體的COX10基因上的rs397763766號插入缺失位點的基因型，可以起到預測個體SCD的易感性的作用。

技術領域

本發明涉及一種基于COX10基因插入缺失多態性位點的心源性猝死易感性檢測試劑盒，屬于檢測技術領域。

背景技術

心源性猝死(sudden cardiac death，SCD)是指由心臟原因引起的突發性的非預料死亡，表現為短期內發生的突發意識喪失及循環、呼吸驟停。“短期”規定為有目擊者情況下小于1小時內，無目擊者時則為24小時。流行病學表明，中國每年每10萬人中有40.7人死于SCD，考慮到我國龐大的人口基數，SCD病例數量十分龐大。以往大量研究表明，SCD的死因多為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病或致命性心律失常。前者多見于高齡人群，后者則多見于年輕人。考慮到死后的尸體解剖和組織學檢查難以找到準確的死因，為了能準確診斷SCD，揭開SCD發生的分子機制、尋找SCD的遺傳標記迫在眉睫。

過去針對SCD診斷領域的研究主要集中于對重要蛋白編碼基因的編碼區突變與猝死的關聯性分析，然而相關的突變不僅數量有限，普通群體極低的基因頻率難以完全解釋相對而言較高的猝死發生率。隨著全基因組關聯研究及二代測序技術的發展，越來越多的遺傳標記被發現參與SCD的調控。SCD遺傳標記的識別能夠進一步深入了解其潛在機制，優化SCD的風險分層，并為分子診斷和預防提供強有力的理論依據。考慮到3'UTR對基因表達起到重要的調控作用，我們把目光投向了這片區域內的遺傳多態，通過病例對照研究分析相關基因中3'UTR的遺傳多態性與SCD的易感性之間的關聯，為建立可用于SCD風險評估的基因多態性檢測體系提供了可能。

細胞色素c氧化酶組裝因子血紅素A：法尼基轉移酶COX10(cytochrome coxidaseassembly factor heme A:farnesyltransferase COX10)，是細胞核基因轉錄的線粒體氧化呼吸鏈上的功能性亞基，是血紅素A輔基生成的關鍵酶。有研究表明其蛋白表達異常可導致體內能量生成障礙，影響心肌細胞的收縮功能,進而導致一系列的心臟功能改變。

現有技術中，并沒有對rs397763766插入缺失多態與SCD相關性的研究報道，也沒有通過檢測COX10基因3'UTR的插入缺失多態位點來預測SCD的易感性的相關報道。

發明內容

為解決上述問題，本發明基于COX10基因上的rs397763766號插入缺失位點的多態性可用于評估個體患SCD的易感性，提供一種檢測SCD易感性的試劑盒。

本發明的第一個目的是提供一種基于COX10基因插入缺失多態性位點的心源性猝死易感性檢測試劑盒，所述的試劑盒用于檢測COX10基因的rs397763766位點的基因型。

進一步地，所述的心源性猝死易感性檢測試劑盒包括用于檢測COX10基因的rs397763766位點的特異性引物對，以及用于PCR擴增和毛細管電泳的組件。

進一步地，所述特異性引物對包括有義引物和反義引物，有義引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，反義引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示：

SEQ ID No.1：5’-CCCCACCCCATTACTGTACC-3’；

SEQ ID No.2：5’-CCCAGCACACCCTTCTTCCT-3’。

進一步地，所述的有義引物的Tm值為62℃，所述的反義引物的Tm值為62℃。