[發明專利]一種基于免疫缺陷小鼠腦癱模型的細胞治療研究方法

在審

• 申請號: 202011079497.2
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112237637A
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 嵐山芮;魏偉;李永生
• 申請（專利權）人: 廣州市天河諾亞生物工程有限公司
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K35/51;A61P25/00;A01K67/02
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文

本發明涉及疾病治療領域，尤其涉及一種基于免疫缺陷小鼠腦癱模型的細胞治療研究方法。本發明的研究方法為：研究臍帶血MNC里A+細胞對腦癱的治療作用時，同時研究A?細胞，即剔除A+細胞后剩余的MNC的治療作用，如果A?細胞也有治療作用，則說明MNC中不只A+細胞有治療腦癱的作用；設定一種MNC中對治療腦癱可能起負調控作用的因素，假設為B+細胞，剔除B+細胞，用剩余的B?細胞進行治療腦癱的研究。本發明在研究臍帶血中某一種細胞對腦癱的治療作用時，考慮到剔除該細胞后剩余成分對腦癱的治療作用，以研究該種細胞是否為唯一作用因素。為研究臍帶血及其成分治療腦癱提供了新的思路。

技術領域

本發明涉及疾病治療領域，尤其涉及一種基于免疫缺陷小鼠腦癱模型的細胞治療研究方法。

背景技術

腦癱(CP)是兒童時期最常見的神經肌肉疾病，可由產前或產后的腦損傷引起。CP有不同的亞型，包括共濟失調、運動障礙、痙攣等等。腦癱兒童表現出一系列復雜的功能障礙，包括行為障礙、感覺和知覺障礙、癲癇、智力遲鈍和語言缺陷等。在CP患者中，還存在與其他嚴重問題并存的問題，例如骨密度和肌肉質量較低，神經肌肉效率低下等。目前，CP的治療已經取得了很大的進展，包括對肌肉、肌腱、骨骼和神經的手術；治療異常肌肉張力、睡眠障礙的藥物治療，等等。然而，這些治療只提供癥狀緩解，其中一些還可能會引起患兒不適。因此，CP仍然沒有治愈方法，仍然是兒科神經發育研究的一個迫切課題。

腦癱是由各種原因所引起的嬰兒在出生前后一個月內出現顱腦損傷或發育缺陷，進而導致的姿勢異常或者運動障礙，屬于非進行性腦損傷。這一觀點盡管已經得到普遍認可，但是其產生的內在機制卻并不得而知。成功地建立近似于人類腦癱腦損傷機制與臨床表現的動物模型是深入研究其發病機制，進行有效干預的基礎。動物的選擇是模型建立的首要條件，多腦回動物如狗、豬、羊、兔等因體積較大、飼養相對困難、費用較貴等原因限制了其在實驗中的大量應用；與人類最接近的靈長類動物則更加昂貴和稀少，不適應實驗研究應用；非多腦回動物如鼠類體形小、數量大、價格便宜、易飼養，行為表現多樣，情緒反應敏感，且其腦體積小便于腦組織病理變化和生化改變的觀察。因此目前國內外大多傾向采用大鼠作為腦癱模型動物。

近年來，干細胞治療作為CP治療的一種新方法引起了人們的廣泛關注。對于治療許多疾病，特別是圍產期腦損傷，使用臍帶血(UCB)或臍帶血單個核細胞(MNCs)研究表明，UCB可能有助于CP的治療。UCB研究表明，UCB細胞可以遷移到CP大鼠腦內的損傷部位減少功能缺陷并保護其免受白質損傷。目前，超過20個臨床試驗正在研究UCB治療腦癱或腦損傷。與任何其他細胞類型相比，UCB細胞治療腦癱兒童的效果最大，在短期(6個月)隨訪有顯著的干預效果。

人UCB-MNCs并非單純的一種細胞，其中含有豐富的造血干細胞(HSCs)、間充質干細胞(MSCs)等多種干細胞和免疫細胞，有些科研工作者分離純化其中的CD34+細胞或MSCs也做了治療腦癱的研究，也取得了不錯的治療效果。甚至有人對CD34+和MNCs進行了對比研究，發現純化的CD34+細胞比MNCs治療效果更好。

但是目前動物實驗中所選用的動物都是常規動物，因其免疫功能正常，對于輸入的臍帶血成分有一定的免疫反應，從而影響研究結果。且現有研究主要考察的是短期治療效果，尚未發現長期研究的報道。目前研究臍帶血(或臍血單個核細胞)成分治療腦癱的作用，往往都是和臍血(或臍血單個核細胞)作比較研究，例如研究臍血單個核細胞(MNC)中CD34+細胞治療腦癱的效果就是和MNC作比較實驗。但因為CD34+細胞來源于MNC，所以二者的比較研究可能證明CD34+細胞的治療效果優于MNC，但不能確定CD34+細胞是MNC起治療腦癱作用的唯一因素。這樣的研究方法容易使研究者錯失MNC中優于CD34+細胞的更有利于腦癱治療的成分。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種基于免疫缺陷小鼠腦癱模型的細胞治療研究方法。