[發(fā)明專利]蠟樣芽孢桿菌角蛋白酶的應(yīng)用及應(yīng)用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011077952.5
• 申請(qǐng)日: 2020-10-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112126536B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邊斐;岳壽松;夏晗;陳高;馬德源;于金慧;張燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心
• 主分類號(hào): C12N9/54
• 分類號(hào): C12N9/54;C11D3/386;C12R1/085
• 代理公司: 濟(jì)南市易拓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37325
• 代理人: 邱蘭雙

本發(fā)明屬于酶的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY?15角蛋白酶的應(yīng)用。本發(fā)明所要重點(diǎn)保護(hù)的是，蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY?15角蛋白酶在制備去垢產(chǎn)品中的應(yīng)用，尤其是該角蛋白酶在制備洗滌產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明的角蛋白酶是由B.cereus Y?15種子液接種到優(yōu)化后的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中培養(yǎng)所獲得的；其具有優(yōu)異的熱穩(wěn)定性，滿足：40℃下酶活半衰期為34～36.5 h；在60℃下的酶活半衰期t1/2為5.5～6h，在65℃半衰期為2.2～2.5 h，在70℃半衰期0.58～0.65h。此外，本發(fā)明的角蛋白酶能耐受還原劑、氧化劑和去垢劑，在工業(yè)生產(chǎn)中有潛在應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于酶的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蠟樣芽孢桿菌角蛋白酶的應(yīng)用。

背景技術(shù)

王秋影等人在《角蛋白酶的應(yīng)用研究進(jìn)展》一文中披露了角蛋白酶的應(yīng)用領(lǐng)域十分廣泛，主要包括肥料、飼料、食品醫(yī)藥、洗滌劑，制革等行業(yè)。

但是上述的文章中還披露：角蛋白酶的最佳作用溫度主要集中在40～70℃，如鏈霉菌為45℃，擬諾卡氏菌為60℃；目前純化的角蛋白酶比如摩加夫芽孢桿菌角蛋白酶在50℃和60℃時(shí)具有較高的穩(wěn)定性，在50℃處理3小時(shí)后酶活仍為100%，在60℃時(shí)半衰期為2.5小時(shí)。

已報(bào)道的角蛋白酶大多屬于絲氨酸蛋白酶S8家族，可被PMSF所抑制。目前亟需尋找更有潛在應(yīng)用價(jià)值、底物更廣泛、有新酶解特點(diǎn)的角蛋白酶資源。

要使角蛋白酶能真正的規(guī)模化應(yīng)用，產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益，就需要提高其耐熱性能，提高其對(duì)抑制劑、還原劑、氧化劑、去垢劑等的耐受性能。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種具有優(yōu)異穩(wěn)定性和耐熱性能的蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15角蛋白酶，將其應(yīng)用于去垢產(chǎn)品的制備中尤其是洗滌產(chǎn)品的制備中，能獲得除垢、去漬優(yōu)異的效果。

蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15角蛋白酶在制備去垢產(chǎn)品中的應(yīng)用；特別的，蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15角蛋白酶在制備洗滌產(chǎn)品中的應(yīng)用；尤其是蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15角蛋白酶在制備具有去除蛋白類污漬的洗滌產(chǎn)品中的應(yīng)用，是本發(fā)明所要保護(hù)的重點(diǎn)。

上述的角蛋白酶是通過(guò)申請(qǐng)?zhí)枮椋篊N 107868762A的專利文獻(xiàn)中的方法制備所獲得；該角蛋白酶（或者是其粗酶液）滿足：40℃下酶活半衰期為34～36 h；在60℃下的酶活半衰期t1/2為5.5～6h，在65℃半衰期為2.2～2.5 h，在70℃半衰期0.58～0.65h。

上述的蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15角蛋白酶既可以是含有角蛋白酶的粗酶液，還可以是經(jīng)分離純化后的角蛋白酶。

角蛋白酶是通過(guò)蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15在降解羽毛角蛋白中產(chǎn)生的胞外分泌物中獲得的。蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereusY-15保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏編號(hào)CGMCC No. 14221。

上述的角蛋白酶是通過(guò)如下的方法獲得的：

將B. cereus Y-15種子液按2%接種量接入優(yōu)化后的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，在30oC，180r/min培養(yǎng)48 h后，離心去菌體得到角蛋白酶的粗酶液（角蛋白酶的獲得方法同專利文獻(xiàn)CN107868762A）；培養(yǎng)基配方：玉米粉2.23%，麩皮2%，豆粕0.88%，K₂HPO₄ 0.1%，KH₂PO₄ 0.1%，CaCl₂ 0.22%。