[發明專利]一種具有緩解膿毒血癥的鼠李糖乳桿菌發酵多糖提取物的制備方法

在審

• 申請號: 202011076453.4
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112226471A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 蘇樂;李昆侖;趙林;岳秋林;趙晨;李寶君
• 申請（專利權）人: 濟南航晨生物科技有限公司;山東晨彰生物科技有限公司;齊魯工業大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C08B37/00;A61P31/04;C12R1/225
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及益生菌發酵多糖和多糖提取領域，具體涉及一種緩解膿毒血癥的鼠李糖乳桿菌發酵多糖提取物的制備方法。本發明所提供的提取物是以鼠李糖乳桿菌發酵特定的多糖培養基之后的發酵液破碎提取而來。本發明是先配置好特定的多糖培養基之后，115℃巴氏消毒15分鐘之后，將鼠李糖乳桿菌接種到滅好菌的特定多糖培養基中進行發酵，獲得發酵液之后，將含有鼠李糖乳桿菌的發酵液進行高壓破碎，收集破碎液中的多糖，干燥獲得成品。

技術領域

本發明屬于食品發酵技術領域，具體涉及一種具有緩解濃度血癥的鼠李糖乳桿菌發酵多糖提取物的制備方法。

背景技術

膿毒血癥是一種由感染引起的全身感染性炎癥疾病。嚴重的膿毒血癥和感染性休克是危重病人常見的危及生命的原因。雖然最近在感染性休克的治療方面取得了進展，并且制定了國際公認的指導原則，但是其死亡率仍然高達30%-60%。目前膿毒血癥的致病原理尚不清楚，導致其預防和治療工作難以推進。雖然其治療方式在抗生素治療、呼吸機管理、復蘇策略和血糖維持等方面取得一定的進展，但是膿毒血癥仍然是ICU中的主要死亡原因。

益生菌是一類能夠定值宿主腸道并對機體產生有益作用的活性微生物的總稱。有報道指出，益生菌不僅能夠調節腸道菌群，還具有抗炎作用，其中發揮主要作用的就是益生菌分泌的多糖。隨著科技的創新和研究的開展，多糖的生產工藝和制備方法的調整和改進將更加有利于對其進行深入研究。

發明內容

為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種具有緩解膿毒血癥的鼠李糖乳桿菌發酵多糖提取物的制備方法。

本發明所提供的鼠李糖多糖乳桿菌提取物的原料主要包括培養鼠李糖乳桿菌的原料。具體包括：乳清蛋白粉、葡萄糖,淀粉、蔗糖、牛肉膏、酵母提取物5.0、乙酸鈉、檸檬酸二銨、吐溫,硫酸鎂,硫酸錳。這些原料按照一定的比例混合可以使鼠李糖乳桿菌生長狀態最好。

本發明的另一個目的就是提出具有緩解膿毒血癥的鼠李糖乳桿菌多糖的提取。技術方案是這樣實現的：

步驟1、培養鼠李糖乳桿菌多糖發酵專業培養基的配置，按照乳清蛋白粉15.0g/L、葡萄糖15 g/L,淀粉5.0g/L、蔗糖3.0g/L、牛肉膏5.0g/L、酵母提取物5.0g/L、乙酸鈉5.0g/L、檸檬酸二銨2.0g/L、吐溫80mL/L,硫酸鎂0.5g/L,硫酸錳0.25 g/L的配比配置液體培養基，115℃滅菌15分鐘。

步驟2、在滅好菌的多糖培養基中接入鼠李糖乳桿菌，在37℃的培養箱中靜止培養24小時，使菌活濃度達到2.0x1011cfu/ml。

步驟3、將培養好的含有鼠李糖乳桿菌的發酵液進行高壓勻漿破碎，收集破碎之后的破碎液，利用0.22微米的濾膜過濾，收集清液。

步驟4、在過濾之后的清液中加入無水乙醇，使無水乙醇的終濃度為總體積的70%，150rpm攪拌30分鐘以后，離心收集沉淀，上述步驟重復3遍，收集的沉淀采用10倍質量的蒸餾水進行溶解。

步驟5、向溶解的液體中加入1%的767醫用活性炭脫色，脫色的問題維持在30-50℃，處理的時間為1-2小時，脫色完畢之后過濾收集上清液，并在上清液中加入無水乙醇，使無水乙醇的終濃度為70%，過濾收集沉淀。

步驟6、將收集的沉淀放置于70-80℃的烘箱中進行烘干，待其重量不在變化的時候，將已經烘干為粉末的多糖產品取出。

優選的，上述步驟1中多糖發酵專用培養基的滅菌條件為115℃，15分鐘。

步驟2中鼠李糖乳桿菌的培養培養溫度為37℃，發酵時間為24小時。

步驟3中采用的是高壓勻漿破碎，利用0.22微米的濾膜過濾。

步驟5中采用1%的767醫用活性炭進行脫色，脫色溫度為30-50℃，脫色時間為1-2個小時。