[發明專利]一種來源于廢棄菌體的農用肽聚糖制備工藝

在審

• 申請號: 202011076452.X
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112225826A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 李昆侖;趙林;張峰;李寶君;趙晨;蘇樂;岳秋林;張娟
• 申請（專利權）人: 濟南航晨生物科技有限公司;山東晨彰生物科技有限公司;山東卓苒生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C05C11/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種來源于廢棄菌渣的肽聚糖的制備工藝。其制作工藝包括尼泊爾菌培養種子，接種于含鹽分較高的谷氨酸廢液中，發酵結束后得菌體，對菌體進行超微粉碎去磷壁酸和蛋白。該生產工藝不需要特殊設備、能耗低、工藝流程簡單、是一種易于產業化并具有良好經濟效益的農業肽聚糖制備工藝。

技術領域

本發明屬于農業肥料領域，涉及一種廢棄菌體的農用肽聚糖制備工藝。

背景技術

肽聚糖(peptidoglycan，PG)是細菌細胞壁的物有組成部分，其基本結構是由N-乙酰葡萄糖胺(N-Acetylglucosamine）和N-乙酰胞壁酸(N-Acetylmuramic Acid)交替連接的雜多糖與不同組成的肽交叉連接形成的大分子。泥泊爾葡萄球菌常用于發酵制備味精廢液降糖，生產后會產生大量的固體菌渣。然而，這些菌渣中含有較多的活性成分，其中肽聚糖為細胞壁的主要成分。有研究表明肽聚糖具有多種生物活性，如抗免疫活性、對蔬菜促生和其它活性等。

目前國內制備肽聚糖細胞壁破碎的方法主要包括化學破碎、物理破碎、生物酶法破碎、機械破碎等，傳統化學法常采用三氯乙酸高溫處理，破壁效果較好，但處理時間長，試劑用量多，用會產生大量廢酸。生物酶破壞即采用相應的溶解酶破壞特定結構間的連接鍵，達到破碎的效果，處理成本相對較高，且效率較低，機械破碎方法包括珠磨、噴霧裝機破碎、高壓勻漿和超聲波破碎等。

發明內容

本發明目的在于針對目前制備肽聚糖的方法較繁瑣，結合尼泊爾葡萄球菌菌體利用率不高的情況，提供了一種超微粉碎機快速破壁，操作簡單、效率高和易工業化生產制作農用粉狀肽聚糖的方法。

本發明所述農用肽糖制備工藝，包括以下步驟：

將活化好的尼泊爾葡萄球菌接入的液體培養基中，37℃培養1-2天。

將培養好尼泊爾葡萄球菌按照體積5%的接種量，接種于無需滅菌的谷氨酸高濃廢液中，經曝氣處理3-5天。

將曝氣處理后液體進行絮凝，絮凝劑為聚丙烯酸鈉，絮凝時間30min，攪拌轉速300rpm/min。

將絮凝處理后液體進行固液分離，收集菌體，分離方法包含但不限于轉速3500-4000rpm/min，離心8-10min。

將菌體低溫干燥，55℃烘干3-8小時至含水量3%。

將所得菌渣加入5-10份氫氧化鈉，進行超微粉碎，超微粉碎時間5min，目的去除磷壁酸。

在加入10-20份十二烷基硫酸鈉進行超微粉碎，超微粉碎時間30min，目的去除蛋白。

所述超微粉碎的功率3000W，菌渣達1000目以上。

向其加入9倍體積的水溶解，將水溶液進行固液分離，分離方法包含但不限于8000-10000rpm/min離心10-20min。

收集沉淀，經55℃烘干3-8小時至恒重，即得肽聚糖粗品。

蛋白質含量測定采用BCA法、中性糖含量測定采用苯酚硫酸法，所得結果即為所述產品含量。

將所得肽聚糖對蔬菜進行噴施，結果有促生作用。

具體實施方式

下面通過具體實例形式對本發明進行進一步詳細說明，但本發明并不局限于此，凡是與本申請相同或相近的技術方案均屬于本發明的內容。

實施例1

該實施例的工藝流程為：

1）選用5份氫氧化鈉，超微粉碎5min去除磷壁酸；

2）選用10份十二烷基硫酸鈉，超微粉碎30min去除蛋白質；